FDA与ISO食品微生物检验方法(5)

大肠菌群及大肠杆菌测定

——MPN法检验流程（FDA BAM）

检样稀释液

适当十倍稀释样品

选择3

每个稀释度接种三管LST肉汤（每管9mlLST肉汤并加有导管），

每管接种1mL

44.5±0.5 ℃ （水浴培养）

24 ± 2h ~48 ± 2h

查MPN表报告结果 产气管接种EMB平板（35℃、18~24h）

（大肠菌群） 从EMB平板上挑取5个可疑菌转接到PCA斜 面，进行革兰氏染色、IMVC生化鉴定、接

种LST复检产气

查MPN表报告结果（大肠杆菌）

大肠菌群测定——MPN法检验几点说明

MPN检索表：

MPN检索表只给了三个稀释度，如改用不同的稀释度，则表内数字应相应降低或增加10倍。 z初发酵和证实试验：

1）两步法进行了两次乳糖发酵试验。初发酵和证实实验所用培养基不同，但都是为了证实培养物是否符合大肠菌群的定义，即“在37℃分解乳糖产酸产气”。

2）初发酵阳性管，不能肯定就是大肠菌群细菌，经过证实试验后，有时可能成为阴性。有数据表明，食品中大肠菌群检验步骤的符合率，初发酵与证实试验相差较大。因此，在实际检测工作中，证实试验是必需的。

z产气量与倒管：

在乳糖发酵试验工作中，经常可以看到在发酵倒管内极微少的气泡（有时比小米粒还小），有时可以遇到在初发酵时产酸或沿管壁有缓缓上浮的小气泡。实验表明，大肠菌群的产气量，多者可以使发酵倒管全部充满气体，少者可以产生比小米粒还小的气泡。如果对产酸但未产气的乳糖发酵如有疑问时，可以用手轻轻打动试管，如有气泡沿管壁上浮，即应考虑可能有气体产生，而应作进一步试验。

大肠杆菌测定——EMB选择性分离鉴别

EMB平板典型大肠杆菌菌落特征：

中心黑色或紫红色，有或无绿色金属光泽 z