ゅ冷世界ｒＲＮＡ序列分析
ｒＲＮＡ基因ＰＣＲ产物凝胶电泳分析
取５一ＰＥＲ产物进行ｌ％琼脂糖凝胶电泳，结果见图２。
１６Ｓ
２结果与分析
２．１培养基的确定
实验结果表明，在牛肉膏蛋白胨、马丁氏和高氏ｌ号培养基上筛选的微生物，有一株细菌产蛋白酶。此株细菌的菌落特征为：表面光滑、潮湿、乳白色、圆形、边缘整齐、隆起、不透
明ｆ图１）
图２
１６ｂ
ｒＲＮＡ基因Ｈ：ｊｔ产物
ＰＣＲｐｒｏｄｕｃｔ０ｆ１６ＳｒＲＮＡ
ＤＮＡ
ｇｅｎｅ
Ｆｉｇｕｒｅ２
注：Ｍ：ＤＬ２，０００负对照。
Ｍｍｌｔ，ｅｔ；１：ＣＩ硝０９—１一ＰＥＲ产物；＋：正对照；一：
使用ＴａＫａＲａＡｇ踟１８ｅＧｅｌＤＮＡＰｕｒｉ６ｃａｔｉｏｎＫｉｔＶｅｔ．２．Ｏ（ＣｏｄｅＮｏ．Ｄｖ８０５Ａ）切胶回收目的片段进行ＤＮＡ测序。２．３．２测序和序列比对
以ｓｅｑＦｏｒｗａｒｄ、ｓｅｑＲｅｖｅｒｓｅ、ＳｅｑＩｎｔｅｒｎａｌ为引物进行ＤＮＡ测
ＥＵ８１５６３５（１４５１ｂｐ）。结果表明，该细菌与Ｐ．ｐｓｅ删／ｇｅｎｅｓ
序。登陆ＮＣＢＩ网站，注册该１６ＳｒＲＮＡ序列，注册号为（ＬＭＧ１２２５Ｔ）的１６ＳｒＲＮＡ具有１００％的相似性，与Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ
ｓｔ）．Ｒ一２４２６１的部分１６ｓ删Ａ具有９９％的相似性。通过Ｍｅｇａ
围Ｊ
Ｆｉｇｕｒｅ
ｌ
筛选出的产蛋白酶细菌形态特征
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４软件，对本研究的分离菌株（Ⅺ【）构建进化树。结果表明，该分离菌株与假单胞菌属（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）在同一个分支上，也即初步推测该分离菌株属于假单胞菌属（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）ｏ序列比
