一株蛋白酶产生菌的分离鉴定(2)

ゅ冷世界 分享 2021-06-01 下载文档

基于生理生化实验和16SrRNA序列分析,本研究对喀什市吐曼河中一株蛋白酶产生菌进行分离和鉴定。本研究以期分析和确定喀什市吐曼河中微生物的种类和代谢产物,同时为喀什市吐曼河的综合治理,尤其是生物治理提出科学依据。

1.1.1培养基制备

1.1.1.1

牛肉膏蛋白胨培养基(∥1):牛肉膏39,蛋白胨lOg,

000rid,pH7.2~7.4。

Ig,

NaC]59,琼脂粉15—209,蒸馏水定容到1

1.1.1.2

高氏一号培养基(g,1):可溶性淀209,l∞b

KI-[P040.59,M99Q4O.59,NaC]O.59,FeS040.019,琼脂209,蒸

馏水1000ml,pH7.2-7.4。

1.1.1.3马丁氏培养基(g,1):葡萄糖109,蛋白胨59,KH2PO,

lg,MgS04 7

H200.59,l%盂加拉红3.3ml,琼脂粉15—209,pH

自然,蒸馏水1000nd灭菌后于加一50℃时加入0.03%链霉稀

释液(me/m1)0.Iml。

1.1.1.4脂酶堵养基(Tween80)(∥1):蛋白胨lOg,NaCI59,CaCI 7H200.019,琼脂99,蒸馏水l000ml,pH7.4,冷却基础培养基至加一50℃,加入Tween80至浓度为l%,倒平板。1.1.1.5苯丙氨酸脱氨酶培养基(g,1):酵母膏39,NaC]59,

Na2HP04、7.0。

lg,琼脂129,DL一苯丙氨酸29,蒸馏水l000ml,pH

1.1.1.6蛋白酶培养基(g,1):1.5%阿尔曼脱脂奶粉溶液,琼脂粉169,蒸馏水1000ml。

1.1.1.7木聚糖酶检测培养基

①透明圈法检测培养基(g/1):K2HP042.09,NI{4NO,2.09,md'04 7H200.29,酵母膏5.og,半纤维素20.og,pH

7.2。

l材料与方法

1.1材料

收稿日期.'2008—08—29;修回13191:2005一ll—07

作者简介:易霞(1979一),女,新疆人,硕士,讲师,从事生化和微,£物学教学及微生物资源研发,Td:0998—2210112,Emeil:yi菇a0110@163.

②半纤维素的制备:将4%Na0H浸泡的小麦秸秆粉在90℃煮沸2h,过滤得滤液。用浓盐酸调pH4.5后,再加入与滤液等体积的无水乙醇以沉淀半纤维素。过滤或离心得沉淀,用无水乙醇洗涤沉淀2次,再将沉淀于45℃下烘干,即得浅黄


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