暖风迷乱邵阳学院2014届毕业设计（论文）
6 7 8 9 K1 K2 K3 K1 K2 K3 R
2 3(0.40) 3 3 0.487 0.331 0.678 0.162 0.110 0.226 0.116
3 1 2 3 0.500 0.518 0.398 0.167 0.173 0.133 0.040
1 3 1 2 0.361 0.539 0.596 0.120 0.180 0.199 0.079
2 2 3 1 0.485 0.433 0.588 0.162 0.144 0.196 0.052
0.009 0.237 0.243 0.198
2.770x106 3.241x107 3.319x107 2.140x107
因素主次顺序 A>C>D>B
优水平 A3 B2 C3 D3 优组合 A3B2C3D3
通过实验结果的直观分析，8号组合A3B2C1D3的菌体含量最高；但是经过计算分析的最优水平为A3B2C3D3。所以为了确定最优水平组合，分别按照这两个水平组合的培养基配方，配制BPG液体培养基，35℃下培养18h，测定其OD420值，确定最优水平。实验结果如表3.7。
表3.7 追加实验数据比较结果
水平组合
活菌数（10）
7
OD420 0.267 0.240
A3B2C3D3 A3B2C1D3
3.631 3.280
由表3.7可得，枯草芽孢杆菌最适生长量的最优组合为A3B2C3D3。
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4.结论及讨论
本文选用BPG液体培养基来培养枯草芽孢杆菌，配方为牛肉膏3.4g，蛋白胨
3.4g，NaCl 3.3g，葡萄糖3.4g，淀粉3.3g，KH2PO43.3g，MnSO4·7H2O0.2g，1000mL蒸馏水，pH7.0。针对其中四个因素：葡萄糖、蛋白胨、牛肉膏、磷酸二
氢钾来进行单因素实验，再进行L9（3）正交实验来确定枯草芽孢杆菌的最优培养基水平组合。最终确定的最优水平组合为A3B2C3D3：牛肉膏4.0g，蛋白胨3.8g，
4
NaCl 3.3g，葡萄糖4.0g，淀粉3.3g，KH2PO4 3.4g，MnSO4·7H2O 0.2g，蒸
馏水1000mL，pH7.0，该条件下，枯草芽孢杆菌生长量为3.631×10CFU/mL。
在本次实验中，得出了以下结论：
1.在四个单因素水平实验（葡萄糖含量、蛋白胨含量、牛肉膏含量、磷酸二氢钾含量）中，葡萄糖含量的改变对枯草芽孢杆菌的生长是四个因素影响水平中占主导地位的。
2.培养基中的四个因素变量的增长不是一直上升的，因为过高的碳源、氮源对微生物的生长是起到抑制作用的，所以在枯草芽孢杆菌培养基的配制中成分的添加都要控制在一定的范围之内。
3.选用的基础BPG液体培养基（配方：牛肉膏 3.4g，蛋白胨 3.4g，NaCl 3.3g，葡萄糖3.4g，淀粉3.3g，KH2PO4 3.3g，MnSO4·7H2O 0.2g，蒸馏水 1000mL，
6 pH 7.0）培养枯草芽胞杆菌，35℃培养18h，检测出来的活菌数为3.2×10CFU/mL，
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而经过实验的出的最佳培养基（配方：牛肉膏4.0g，蛋白胨3.8g，NaCl 3.3g，葡萄糖4.0g，淀粉3.3g，KH2PO4 3.4g，MnSO4·7H2O 0.2g，蒸馏水1000mL，
pH 7.0），培养的枯草芽孢杆菌的活菌数为3.631×107CFU/mL，相比原本的基础培
养基，枯草芽孢杆菌的活菌数增大了一个数量级，所以认为本实验对枯草芽孢杆菌
BPG液体培养基成分的优化是起到了一定的效果。
4.因为该课题《枯草芽孢杆菌培养基的优化研究》和同组的赵天武同学研究的课题《枯草芽孢杆菌培养条件的优化研究》有很多相关联的地方，所以两个课题的实验结果可以相互比较从而从不同角度的角度发现问题。
赵天武同学培养出来的液体培养基检测的OD420值和活菌数相对于本文研究的液体培养基检测出来的实验数据相差不大，本文最优培养基成分培养的枯草芽孢杆菌
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的菌含量为3.631×10CFU/mL，而他最优培养条件下枯草芽孢杆菌的含菌量为
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3.785×107CFU/mL。所以对于枯草芽孢杆菌BPG液体培养基而言，无论是培养成
分和培养条件对其菌种的生长量的影响都是具有相当重要的，所以在往后培养枯草芽孢杆菌的研究道路上，可以针对这两个方面进行进一步优化。
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致谢
毕业论文暂告收尾，这也意味着我在学院的四年的学习生活既将结束。回首既往，
自己一生最宝贵的时光能于这样的校园之中，能在众多学富五车、才华横溢的老师们的熏陶下度过，实是荣幸之极。在这四年的时间里，我在学习上和思想上都受益非浅。这除了自身努力外，与各位老师、同学和朋友的关心、支持和鼓励是分不开的。
论文的写作是枯燥艰辛而又富有挑战的。老师的谆谆诱导、同学的出谋划策及家长的支持鼓励，是我坚持完成论文的动力源泉。在此，我特别要感谢我的导师。从论文的选题、文献的采集、框架的设计、结构的布局到最终的论文定稿，从内容到格式，从标题到标点，她都费尽心血。没有老师的辛勤栽培、孜孜教诲，就没有我论文的顺利完成。
感谢生物工程的各位同学，与他们的交流使我受益颇多。最后要感谢我的家人以及我的朋友们对我的理解、支持、鼓励和帮助，正是因为有了他们，我所做的一切才更有意义；也正是因为有了他们，我才有了追求进步的勇气和信心。
在此向他们表示我由衷的谢意，并祝所有的老师培养出越来越多的优秀人才，桃李满天下！
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