暖风迷乱邵阳学院2014届毕业设计（论文）
在固定氯化钠0.33g、淀粉0.33g、硫酸锰0.02g、pH7.0、100mL水的前提下，通过四个单因素实验确定葡萄糖、蛋白胨、牛肉膏、磷酸二氢钾的最适含量。实验结果如下。
3.2.1葡萄糖含量对枯草芽孢杆菌生长量的影响
为确定葡萄糖的最适含量，在蛋白胨0.34g、牛肉膏0.34g、磷酸二氢钾0.33g、氯化钠0.33g、淀粉0.33g、硫酸锰0.02g的情况下，分别加入0.32g，0.34g，0.36g，
0.38g，0.40g的葡萄糖含量，35℃下培养18h，检测其OD420值，根据标准曲线
换算，以确定葡萄糖的最佳含量。结果见表3.2及图3.2。
表3.2 葡萄糖含量对枯草芽孢杆菌生长的影响
葡萄糖含量（g）
活菌数（10）
7
OD420 0.163 0.157 0.179 0.196 0.189
0.32 0.34 0.36 0.38 0.40
2.279 2.201 2.487 2.708 2.617
图3.2 葡萄糖含量对枯草芽孢杆菌生长的影响
图3.2显示，当葡萄糖含量为0.32g，0.34g，0.36g，0.38g，0.40g时，其
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测得的OD420分别为0.163、0.157、0.179、0.196、0.189。所以可以得出，随着葡萄糖含量的增大，OD420值也随之增加，直到葡萄糖含量为0.38g时，菌含量达到最高值，为2.708×10CFU/mL，之后随着葡萄糖含量的增加，菌含量值逐渐减小。这是由于当碳源含量过高时，反而抑制微生物的生长，因此葡萄糖的最适含量为0.38g。
3.1.2蛋白胨含量对枯草芽孢杆菌生长量的影响
为确定蛋白胨的最适含量，在葡萄糖0.34g、牛肉膏0.34g、磷酸二氢钾0.33g、氯化钠0.33g、淀粉0.33g、硫酸锰0.02g的情况下，分别加入0.32g，0.34g，0.36g，
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0.40g的蛋白胨含量，35℃下培养18h，检测其OD420值，以确定最佳的蛋白胨含
量。结果见表3.3及图3.3。
图3.3显示，当蛋白胨含量为0.32g，0.34g，0.3i6g，0.38g，0.40g时，其测得的OD420分别为0.204、0.231、0.253、0.256、0.206。所以可以得出，随着蛋白胨含量的增大，OD420值也随之增加，直到蛋白胨含量为0.38g时，菌含量达到最大值，为3.488×10CFU/mL，之后随着蛋白胨含量的增加，菌含量值逐渐减小。这是由于碳源及氮源含量过高时，反而会抑制微生物的生长，因此蛋白胨的最适含量为0.38g。
表3.3 蛋白胨含量对枯草芽孢杆菌生长的影响
蛋白胨含量（g）
活菌数（10）
7
7
OD420 0.204 0.231 0.253 0.256
0.206
0.32 0.34 0.36 0.38
0.40
2.812 3.163 3.449 3.488
2.838
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图3.3 蛋白胨含量对枯草芽孢杆菌生长的影响
3.1.3牛肉膏含量对枯草芽孢杆菌生长量的影响
为确定牛肉膏的最适含量，在蛋白胨0.34g、葡萄糖0.34g、磷酸二氢钾0.33g、氯化钠0.33g、淀粉0.33g、硫酸锰0.02g的情况下，分别加入0.32g，0.34g，0.36g，
0.40g的牛肉膏含量，35℃培养18h，检测其OD420值，以确定最佳的牛肉膏含量。
结果见表3.4及图3.4。
图3.4显示，当牛肉膏含量为0.32g，0.34g，0.36g，0.38g，0.40g时，其测得的OD420分别为0.187、0.194、0.184、0.220、0.178。所以，由表3.4可以得出，随着牛肉膏含量的增大，OD420值也随之增加，直到牛肉膏含量为0.38g时，菌含量达到最大值，为3.020×10CFU/mL，之后随着牛肉膏含量的增加，菌含量值逐渐减小。这是由于碳源含量过高时，反而会抑制微生物的生长，因此牛肉膏的最适含量为0.38g。
表3.4 牛肉膏含量对枯草芽孢杆菌生长的影响
牛肉膏含量（g）
活菌数（10）
7
7
OD420 0.187 0.194 0.184 0.220 0.178
0.32 0.34 0.36 0.38 0.40
2.591 2.682 2.552 3.020 2.474
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图3.4 牛肉膏含量对枯草芽孢杆菌生长的影响
3.1.4磷酸二氢钾含量对枯草芽孢杆菌生长量的影响
为了确定磷酸二氢钾的最适含量，在蛋白胨0.34g、牛肉膏0.34g、葡萄糖0.34g、氯化钠0.33g、淀粉0.33g、硫酸锰0.02g的情况下，分别加入0.31g，0.32g，0.33g，
0.34g，0.35g的磷酸二氢钾的含量，35℃培养18h，检测其OD420值，以确定最佳
的磷酸二氢钾的含量。结果见表3.5及图3.5。
图3.5显示，当磷酸二氢钾含量为0.31g，0.32g，0.33g，0.34g，0.35g时，其测得的OD420分别为0.175、0.189、0.247、0.218、0.187。所以，由表3.5可以得出，随着磷酸二氢钾含量的增大，OD420值也随之增加，直到磷酸二氢钾含量为
0.38g时，菌含量达到最大值，为3.371×107CFU/mL，之后随着磷酸二氢钾含量的
增加，菌含量值逐渐减小。这是由于无机盐含量的过高，反而会抑制微生物的生长，因此磷酸二氢钾的最适含量为0.33g。
表3.5 磷酸二氢钾含量对枯草芽孢杆菌生长的影响
磷酸二氢钾含量（g）
活菌数（10）
7
OD420 0.175 0.189
0.31 0.32
2.435 2.617
10
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0.33 0.34 0.35
3.371 2.994 2.591
0.247 0.218 0.187
图3.5 磷酸二氢钾含量对枯草芽孢杆菌生长的影响
3.2正交试验结果
参照单因素实验，确定氯化钠加入量为0.33g、淀粉加入量为0.33g、硫酸锰加入量0.02g、pH为7.0、水加入量为100mL，以影响枯草芽孢杆菌生长量的葡萄糖、蛋白胨、牛肉膏、磷酸二氢钾为四个影响因素，取各自三个水平进行正交实验，因素水平表见表3.6。
表3.6 正交试验设计直观分析表
序号
A葡萄糖/g
B蛋白胨/g
C牛肉膏/g D磷酸二氢钾/g OD420 活菌数(10)
7
1 2 3 4 5
1(0.36) 1 1 2(0.38) 2
1(0.36) 2(0.38) 3(0.40) 1 2
1(0.36) 2(0.38) 3(0.40) 2 3
11
1(0.32) 2(0.33) 3(0.34) 3 1
0.109 0.187 0.191 0.154
1.577 2.591 2.643 2.162x107
0.168 2.344x107
