PCR实验室SOP文件 (10)

温度校准标准操作程序

1、目的: 保证实验时温度的准确 2、范围: 基因扩增实验室所有温控的仪器 3.负责人: 操作人: 4、程序

4.1温度计校准程序:

4.1.1 由设备科人员送质检局对温度计进行校准。每年进行1次。 4.1.2经校准过的温度计可作为微量恒温器温度校温的参照。 4.2 水浴箱温度校准程序:

4.2.1 将水浴箱调至所设置的温度,等水温稳定以后,进行测量。 4.2.2 取出一只已经技术监督局校准后的温度计进行测量。 4.2.3 计下读数,重复在不同温度下测量。

4.2.4 经测量的温度和水浴箱显示温度进行比较,计算出误差。 4.2.5 将水浴箱调至校准后的温度。 4.2.6 每次试验前都必须进行此项工作。 4.3 冰箱温度的校准:(4℃冰箱和—20℃冰箱)

4.3.1 每次实验前都需对冰箱温度进行记录,绘置冰箱温度的质控图。

4.3.2 取一只已经技术监督局校准后的温度计对冰箱温度进行实际测量,并计下读数。 4.3.3 反复多次测量,如超出规定范围,将冰箱调至所需温度。 4.4 扩增仪温度的校准

4.4.1 将扩增仪打开并设至一温度。

4.4.2 在扩增仪的温控孔入放一个反应管,待温度长至所设温度时,用一只已经持术监督局校准过和温度计插入反应管中进行测量温度并记录。

4.4.3 在不同温度点进行重复测量,取均值,并与扩增仪的显示温度进行比较。 4.4.4 由于仪器较精密,温度相差太大则需请厂家前来校准并调试。 4.4.5 经调试后贴上绿色标签,标明时间仪器的性能状态。 5. 本文涉及以下图表

PCR实验室环境温湿度记录表 冰箱温度质控图

美国伯乐 PTC-200型PCR扩增仪的标准程序

1.目的:使PE 5700型核酸扩增荧光检测仪能够正确和正常的使用,保证扩增及结果分析的标准化、规范化。 2.适用范围:PE 5700型核酸扩增荧光检测仪。 3.负责人: 操作人: ?4. 性能参数:见说明书。 5. 操作程序: 5.1 启动DNA引擎。

5.2 启动程序:从主菜单中选择“Enter”,按Proceed 键。

5.3 程序命名:按Select 键前后翻找字母和符号,找到后按Proceed 键选定该字符,同时光标右移一格。数字和破折号可以通过按小键盘上相应的键来插入。名字输入完毕,按一次Proceed 键确认最后一个字符,再次按Proceed 键确认整个名字。

5.4 选择控温方法:选择一种控温方法,按Proceed 键。

5.5 设定温度步骤:从输入菜单中选择“Temp”,按Proceed 键。用键盘输入-5.0到105.0之间的数字作为目标温度数,按Proceed 键。输入该步骤的维持时间,按Proceed 键。选择“Yes”,按Proceed 键。从输入菜单中选择“Go To”,按Proceed 键。输入循环返回的步骤序号,按Proceed 键。输入程序返回该步骤的次数,按Proceed 键。选择“Yes”,按Proceed 键。

5.6 输入结束步骤:从输入菜单中选择“End”,按Proceed 键。选择“Yes”,按Proceed 键。选择存储程序的目标文件夹,按Proceed 键。

5.7 选择运行已存储的操作程序:从主菜单中选择“Run”,按Proceed 键。选择含有目标程序的文件夹,按Proceed 键。用Select 键翻找列出的操作程序,选择目标程序,按Proceed 键。 5.8 选择一种模块来运行操作程序:按Block 键选择不同的模块。

5.9 设定Calculated-control的操作程序:若用聚丙烯管或聚丙烯微量反应板作容器,选择“TUBES”,按Proceed 键。对于只装载管子的模块,根据所载管子类型选择“Thin”或“Thick”,按Proceed 键。 5.10 根据屏幕提示用小键盘输入样本反应容积(微升数),按Proceed 键。

5.11 当屏幕提示是否应用热盖,据需要选择“Yes”或“No”,按Proceed 键。此时操作程序开始运行。

6.PCR仪的常规维护

?6.1样品槽的清洁

样品槽每月进行一次清洁,如出现样品槽污染情况则随时清洁。 操作方法:

从样品槽移去样品架。

在样品槽中加入少量浓度≥75%乙醇,用尼龙棉签或塑料杆擦洗反应孔。

用干棉签吸干乙醇。 6.2 热盖的清洁

热盖每月进行一次清洁,如有需要随时进行。

用经过浓度≥75%乙醇湿润的镜头纸或脱脂棉球清洁加热盖,待干。

ABI 7300型核酸扩增荧光仪操作维护程序

1.目的:使ABI 7300型核酸扩增荧光检测仪能够正确和正常的使用,保证扩增及结果分析的标准化、规范

化。

2.适用范围:ABI 7300型核酸扩增荧光检测仪。 3.负责人: 操作人: ?4. 性能参数:见说明书。 5. 操作程序:

7 . 相关记录 仪器使用登记表

仪器设备维护和校准记录表 仪器设备检定周期表 仪器设备维修申请表 仪器报废(停用)单 仪器设备使用授权表 仪器设备档案卡

仪器设备领(借)用登记表 仪 器 设 备 总 表

DYY-6C电泳仪标准操作规程

1目的:建立电泳仪使用标准操作规程,规范其操作 2适用范围:适用于DYY-6C电泳仪的使用操作 3.负责人: 操作人: 4操作程序

4.1 接好电源线并确认与有接地保护的电源插座相连。 4.2 按颜色接好电泳槽与电泳仪的连接导线,并装入电泳样品。 4.3 确认电源符合要求后,开启一起的“电源开关”。 4.4 此时“液晶显示屏”显示:

欢 迎 使 用 D Y Y – 6 C 型 电 泳 仪 北京市六一仪器厂 同时仪器蜂鸣4声,然后显示上一次工作的设定值:

Us=400V Is=400mA Ts=1:30 T=1:00---Start T=0:00---Go on 对于每次重复同一参数使用时,即可直接选择Start后启动输出。

4.5 如要改变其数值可按上【▲】下【▼】按键,每按一次改变一个数字量;如希望快速改变可按住按键不放松,则数值会连续快速改变,当到达所需数值时松开即可。

4.6 如希望查看并设定电压、电流和定时时间,可以按【选择】键,此时←指示相应位置。同样,其数值由上下调节按键控制。

4.7 设定时时间的范围为:1分~99小时59分。

4.8 按【启/停】键后,仪器鸣响4声,输出启动,“输出指示灯”闪亮,当输出稳定后,稳压/稳流状态改变时,仪器会自动鸣响2声以示提醒用户。

仪器正常输出后,设定值Us、Is、Ts自动变为实际值U、I、T。 4.9 如果没有达到预想的稳定之,可采取两方面措施解决: (1)检查电泳样品的配置是否正常; (2)调节相应电压电流的设定值。

4.10 在仪器正常输出时,按【选择】键,相应显示:

Us Is Ts T


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