第03章 显微镜教学指导(3)

九夏南笙 分享 2021-06-03 下载文档

4.1.3 光学显微镜的性能参数

放大率:显微镜的放大率(amplification)或称放大倍数是指显微镜经多次成像后最终所成(放大的)像的大小相对于原物体大小的比值。

数值孔径:数值孔径(numerical aperture)又叫镜口率,是物体与物镜间媒质的折射率n与物镜孔径角的一半(β)正弦值的乘积,通常缩写为NA。

分辨率:显微镜的分辨率(distinguishability)又称为分辨本领(resolving power),是指透镜能分辨两点之间的最小距离。

视野:视野(visual field)又称视场(field),是指通过显微镜所能看到标本所在空间的范围。 景深与焦长:景深(depth of field)又称焦点深度,是指在成一幅清晰像的前提下,像平面不变,景物沿光轴前后移动的距离称“景深”。景物不动,像平面沿光轴前后移动的距离称“焦长”。

镜像亮度和清晰度:镜像亮度即显微镜的图像亮度的简称。镜像清晰度是指图像的轮廓清晰、衬度适中的程度。

工作距离:工作距离是指从物镜前表面中心到被观察标本间满足工作要求的距离范围,与物镜的数值孔径成反比。

4.2 电子显微镜

4.2.1 电子显微镜的基本结构

电子显微镜主要由电子光学系统、真空系统、供电系统、机械系统和观察显示系统等几部分组成。电子光学系统主要由电子透镜和电子枪组成。

真空系统主要由机械泵、油扩散泵或离子泵、联动控制阀门、真空排气管道、空气过滤器和用于真空度指示的真空测量规等组成。

供电系统包括高压电源、真空系统供电电源、透镜电源、辅助电源及安全保护系统的电源等。 机械系统包括电镜座、标本室、磁屏蔽外壳、镜筒、制冷系统及控制工作台等。

观察显示系统由荧光屏和照相室两部分组成。

4.2.2 电子显微镜的分类及其应用

透射电子显微镜:透射电子显微镜是以电子束透过样品经过聚焦与放大后所产生的物像, 投射到荧光屏上或照相底片上进行观察。透射电镜的分辨率为0.1~0.2nm,放大倍数为几万~几十万倍。由于电子易散射或被物体吸收,故穿透力低,必须制备更薄的超薄切片(通常为50~100nm)。在生物医学中主要用于观察组织和细胞内的亚显微结构、蛋白质、核酸等大分子的形态结构及病毒的形态结构等,另外,透射电镜还是区分细胞凋亡与细胞坏死最可靠的方法。细菌细胞结构,鞭毛结构,放线菌的孢子结


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