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图
10.指出在
时,四种核苷酸所带的电荷数(或所带电荷数多少的
比较),并回答下列问题:
(1)电泳分离四种核苷酸时,缓冲液应取哪个pH 比较合适?此时它们是向哪一极移动?移动的快慢顺序如何?
(2)当要把上述四种核苷酸吸附于阴离子树脂柱上时,应调到什么pH?
(3)如果用洗脱液对限离子交换树脂上的四种核苷酸进行洗脱分离时,洗脱液应调到什么pH?这四种核苷酸上的洗脱顺序如何?为什么?
【答案】各种核苷酸带电荷情况如表所示:
表
(1)电泳分离四种核苷酸时应取的缓冲液,在该pH 时,这四种单核苷酸之间所带负电荷差异较大,它们都向正极移动,但移动的速度不同,依次为:UMP>GMP>AMP>CMP
(2)应取PH8.0,这样可使各核苷酸带较多负电荷,利于核苷酸吸附于阴离子交换树脂柱。虽然时核苷酸带有更多的负电荷,但pH 过高对树脂不利。

