表观遗传学药物影响乳腺癌细胞系抑癌基因BRCA1及CHD5表达的研究(4)

表达量均降低至空白对照组表达量的3倍左右（T47D，2．88～3．47；MCF-7，3．54～4．43）（图3）。

AZA作用可降低HBL-100细胞CHD5的表达，各浓

度组表达量降至空白对照组的0．45～0．68

。

图2TSA对乳腺癌细胞系BRCA1表达的影响

Fig．2InfluenceofTSAontheBRCA1expressioninbreastcancer

cells

图3AZA对乳腺癌细胞系CHD5表达的影响

Fig．3InfluenceofAZAontheCHD5expressioninbreastcancercells

T47D细胞经TSA作用后，0．25μmol/L和0．5μmol/L组CHD5表达量在24h及以后始见升高，0．75μmol/LTSA作用48h达最高值，为空白对照组的7．28倍（P＜0．05）；1．5μmol/LTSA作用使CHD50．75、1．0及1．5μmol/L组72h均检测不到表达降低，

CHD5表达。各浓度TSA均可使MCF-7细胞CHD5

0．5及0．75μmol/L组48h内表达升高，且在0．25、

0．75μmol/LTSA作用48h呈剂量及时间依赖性，

达最高值，为空白对照组的5．46倍（P＜0．05）（图4）。TSA可降低HBL-100细胞CHD5表达，且0．75μmol/L组48h、1μmol/L和1．5μmol/L作用24h后该基因表达均已检测不到

。

图4TSA对乳腺癌细胞系CHD5表达的影响

Fig．4InfluenceofTSAontheCHD5expressioninbreastcancercells

2．3AZA和TSA对乳腺癌细胞系BRCA1及

选取T47D和

CHD5基因甲基化状态的影响

MCF-7细胞经药物作用后抑癌基因表达至最高值及同时期空白对照组的DNA样品，行MSP检测抑7及T47D癌基因的甲基化状态。BRCA1在MCF-MSP未见AZA和TSA细胞中均呈非甲基化状态，

7中呈非甲基影响其甲基化状态。CHD5在MCF-且用药后MSP检测未见变化；该基因在化状态，

T47D中呈不完全甲基化状态，经2．5μmol/LAZA或0．75μmol/LTSA作用48h后，其甲基化状态得到逆转（图5）。

图5

乳腺癌细胞系BRCA1（A）和CHD5（B）基因甲基化

状态

Fig．5MethylationstatusanalysisofBRCA1（A）andCHD5

（B）inbreastcancercellsbymethylation-specificPCR