表观遗传学药物影响乳腺癌细胞系抑癌基因BRCA1及CHD5表达的研究

第49卷Vol．49第7期No．7山东大学学报（医学版）

JOURNALOFSHANDONGUNIVERSITY（HEALTHSCIENCES）2011年7月Jul．2011

文章编号：1671－7554（2011）07－0029－06

表观遗传学药物影响乳腺癌细胞系抑癌基因BRCA1及CHD5表达的研究

1，23241

王新刚，王笑峰，李福年，侯琳，杨其峰

（1．山东大学齐鲁医院乳腺外科，济南250012；2．青岛大学医学院附属医院乳腺外科，山东青岛266100；

3．青岛大学医学院微生物学教研室，山东青岛266021；

4．青岛大学医学院生物化学与分子生物学教研室，山东青岛266021）

摘要：目的明确表观遗传学药物对乳腺癌细胞系抑癌基因BRCA1及CHD5表达的作用，探讨此类药物在乳腺

AZA和组蛋白去乙酰化酶抑制剂TSA分别作用于乳腺采用去甲基化制剂5-

癌临床治疗中的合理应用。方法

MCF-7及乳腺正常上皮细胞HBL-100，5-AZA终浓度分别为0、0．5、1．0、2．5、5．0和10．0μmol/L，癌细胞系T47D、

TSA终浓度分别为0、0．25、0．5、0．75、1．0和1．5μmol/L。荧光定量RT-PCR检测各浓度5-AZA作用12、24、4812、24、48及72hBRCA1和CHD5的表达水平，及72h，各浓度TSA作用6、并行甲基化特异PCR（MSP）检测两基因的甲基化状态。结果2．5μmol/LAZA和0．5μmol/LTSA作用可提高乳腺癌细胞系BRCA1及CHD5的表1．5μmol/LTSA作用反致表达降低，达，而10μmol/LAZA和1．0、且对乳腺正常上皮细胞呈毒性作用。MSP未7细胞两抑癌基因及T47D细胞BRCA1甲基化状态的影响，能发现AZA和TSA对MCF-而两种药物均可逆转T47D细胞CHD5的甲基化状态。结论

表观遗传学药物对乳腺癌细胞抑癌基因表达的影响具有给药剂量及时

本研究可为此类药物在乳腺癌治疗中的科学应用提供实验依据。间限制性，

BRCA1；基因，CHD5关键词：乳腺肿瘤；表观遗传学；基因，中图分类号：R737．9

文献标志码：A

EffectsofepigeneticdrugsonBRCA1andCHD5expressions

inbreastcancercells

2

WANGXin-gang1，，WANGXiao-feng3，LIFu-nian2，HOULin4，YANGQi-feng1

（1．DepartmentofBreastSurgery，QiluHospitalofShandongUniversity，Jinan250012，China；2．DepartmentofBreastSurgery，AffiliatedHospitalofMedicalCollegeofQingdaoUniversity，

Qingdao266100，Shandong，China；

3．DepartmentofMedicalMicrobiology，MedicalCollege，QingdaoUniversity，Qingdao266021，Shandong，China；

4．DepartmentofBiochemistryandMolecularBiology，MedicalCollege，QingdaoUniversity，

Qingdao266021，Shandong，China）

Abstract：Objective

Toinvestigateeffectsofepigeneticdrugsonexpressionsofbreastcancersusceptibilitygene1

MCF-7，T47DandHBL-100cellswereexposedto5-azacytidine（5-

（BRCA1）andchromodomainhelicaseDNA-bindingprotein（CHD5）inbreastcancercells，andexploretheproperuseofthesedrugsinbreastcancertherapy．Methods

AZA）of0，0．5，1．0，2．5，5．0and10．0μmol/Lfor12，24，48and72h，andtrichostatinA（TSA）of0，0．25，0．5，0．75，1and1．5μmol/Lfor6，12，24，48and72h．Aftertreatment，BRCA1andCHD5expressionsweredeterminedbyquantitativeRT-PCR，andmethylationstatusofbothgeneswasdeterminedbymethylation-specificPCR（MSP）．

03-31收稿日期：2011-基金项目：山东省教育厅课题（J09LC19）。

作者简介：王新刚（1978－），男，博士研究生，主要从事肿瘤分子生物学的研究。

mail：qifengy@gmail．com通讯作者：杨其峰（1970－），男，博士生导师，主要从事肿瘤分子生物学的研究。E-