纤维素酶酶活的测定方法(2)

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中国饲料!..!年第#:期

（$%）、冰醋酸（$%）、甲苯!"#"#试剂醋酸钠

（$%）、氢氧化钠（$%）、酒石酸钾钠（$%）、苯酚（$%）、亚硫酸钠（$%）、（$%）、&，’(二硝基水杨酸新华’号滤纸（剪成#)*+&)*纸条）。!"#"!仪器同,-,法。!"#"&

试剂配制

!"#"&"#."#*/012345"6醋酸—醋酸钠缓冲液准确称取醋酸钠（,4&,7789 &4!7）6":.;和冰醋酸!"6.*2，以蒸馏水溶解，定容至#...*2。其他操作吸取5*2蒸馏水代替5*2酶液，

同样品测定作空白测定。!"5

结果计算滤纸酶活力（BC）D

C+@

!5>5.=*;1;

+#’

式中：——从标准曲线上查得的净葡萄糖C—

5毫克数（*;）；————’*2反@—

’

——吸取#*2酶解液进行应液中含5*2酶液；#—!"#"&"!&，’(二硝基水杨酸显色液配制同

,-,法。!"!

标准曲线绘制

同,-,法。

!"&测定方法酶液制备同,-,法。样品测定方法为：准确吸取5*2酶液和#*2缓冲液于试管中，加入新华’号滤纸条一条，滴入甲苯!<&滴防腐，5.=静止反应!5>。吸取滤纸酶解液#*2，加蒸馏水#"’*2、&，’(二硝基水杨酸溶液

!"’*2于试管中，

沸水浴煮沸’*?@，冷却后在’&.@*处比色测定光密度7A值。

万方数据

测定。&

讨论

作为底物的羧甲基纤维素钠，用不同厂家生产的滤纸测定酶活时，结果不尽相同，有时相差还较大。因此，得出酶活力结论时应注明底物产地。

纤维素酶是一种微生物活性制剂，对温度、酸碱度十分敏感，不同菌株生产的纤维素酶最适34值、最佳作用温度有所不同，测定方法有待进一步探讨。

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