① 表皮:皮层外部细胞木栓化,形成后生皮层 如:藜芦 ② 皮层:a.外侧有的细胞形成木栓组织,如:生姜
b.皮层宽广,常有叶迹维管束散在
c.内皮层大多明显,具凯氏带
③ 中柱:有多数维管束散部,有限外韧型,也有周末型 ④ 髓部不明显 3.蕨类植物根茎
⑴表皮:下皮层为厚壁细胞,内部为薄壁基本组织
⑵网状中柱:因根茎叶髓的延伸和相互重叠,将维管束分割成束,切面可见断续环状排列的周韧型Ve,每一维管束外围有内皮层,又称分体中柱,其形状、数目和排列方式是鉴定品种的重要依据。在环列的分体中柱外方,有叶迹维管束。如:贯众,有的具双韧管状中柱
⑶木质部排成环圈,其内外两侧均有韧部及内皮层环。 ⑷中央有髓。如:狗脊
注意:蕨类植物根茎的木质部一般无导管而有管胞,为梯纹,基本组织的细胞间隙中有间隙腺毛。在根茎中常有分泌组织、厚壁组织等要注意观察,如油细胞,石细胞,淀粉粒,针晶束等。
显微镜的使用、徒手切片法及绘图法
一.
实验目的
⑴掌握徒手切片、表面制片方法
⑵熟悉显微镜使用方法及作图要领 二.实验内容 1. 显微镜的使用
生物显微镜由光学部分和机械部分组成
⑴光学部分——目镜、物镜、聚光器、可变光栏、反射镜
※ 两次放大,即物镜将标本做第一次放大,目镜将第一次放大的像做第二次放大,两者相乘即是观察到的放大倍数
⑵机械部分包括镜坐、镜臂、镜筒、载物台、粗细调节手轮及推动器 ⑶操作:
① 将显微镜防置离桌缘约10厘米处
② 对光:上升聚光镜至载物台水平,打开光栏,将低倍镜转至镜筒的正下放(用转盘听到“得”一声)转动反光镜,同时从接目镜向下看,直至明亮均匀在视野。 ③ 装片:将观察的标本片从镜前方横置于载物台上
④ 调节焦距:向外旋转粗调节手轮,使镜筒慢慢下降,注意镜头与标本的距离,自目镜向下观察直至物像清楚为止。(向外物镜下降,向内物镜上升) 另外:高倍镜应先在低倍镜下选择物像,移至视野中心,转动转盘使高倍镜转至镜筒正下方,应能看到欲观察之物像,用细调节手轮使之图象清晰。 ⑷注意点:
① 取拿显微镜时,一手握镜臂,一手托镜坐,轻取轻放。 ② 先用低倍镜观察,看清物象后再换高倍镜,
③ 在用高倍镜观察时,注意物镜与所观察标本的间距,以防错误操作,而损坏镜头,压碎标本片
④ 注意保持显微镜的干燥和清洁,不得随意拆卸镜头,镜头要用擦镜纸擦拂,要防止水或药液外溢而污染镜头及其他部位。 2. 徒手切片法
系用刀片或徒手切片器将材料切成薄片,可在显微镜下观察组织构造、细胞特征的制片法。
材料:新鲜应除净泥沙、干燥须经软化,
优点:简便快速能保持植物原有结构的真像,色彩和内含物 缺点:厚薄不一,不利于长期保存。 ① 方法
a:取材,固定与切片:选取易软化的中药材适当部位,切成2-3厘米的小段,用拇指及食指和中指夹住材料,下端用无名指托住,另手持刀片自左向右移动手腕,牵拽切片,动作要轻要快,切禁不能是拉锯式,在切的同时经常用水湿润,对于叶或柔软的材料,须用材料夹住。(如用胡萝卜、马铃薯等)
b:装片:将切好的薄片用毛笔小心移入盛有清水的培养皿中,取载玻片滴加甘油和试液,用镊子或毛笔将切片移于其上。再加一滴甘油于片上,加上盖玻片,加盖玻片时以45度角避免产生气泡,也可滴加水合氯醛试液加热透化,再滴加稀甘油,加盖薄片后进行观察。 3. 表面制片法
多用于对叶片、果实或草本植物茎表皮组织的观察,可观察到表皮细胞形态(波浪形、长方形、圆形、多角形)、气孔类型(不等式、不定式、平轴式、垂轴式等)、毛茸特征(星状毛、人字毛、T形毛)和着生情况,通常用钟表镊子夹住叶片或果实的表面,轻轻撕取(叶片可沿叶脉撕取、果实可沿果柄撕取)其表皮置于载玻片上的水、甘油或水合氯醛试液内,注意其上表面朝上方,加盖玻片观察。 4. 绘图要领
在中药的性状和显微鉴定工作中,图可以集中的突出表现实物的主要特征,有些特征比摄影照片效果还好,因此除去用文字记录观察到的外形、组织、细胞及内含物特征外,有时还需要绘出中药材的外形和显微图,以补充文字叙述的不足,因此绘图是中药鉴定和研究工作中的一项基本技能 注意: ① 绘制精确的图形要根据观察的实物 ② 绘图有显微描绘法和徒手法两种
③ 按绘图工具常分,铅笔绘图法和墨线绘图法两种
其中绘显微组织图和粉末图要用通用的代表符号。见下图
对中药形状图要求富有立体感,不能随意夸张和任意涂影,必须要有一定的透视知识如:前大后小、近明远暗、透视方向要一致等基础知识。 (1)绘图原则
① 一切结构均用线条来表示
② 不能借助工具,必须徒手作图,与建筑设计图相区别
③ 显示立体结构可用透视线来表示,可以用圆点衬托明暗光线,不能涂影,点
要小而圆,由密到稀逐步过渡。 ④ 各部位应先画出引线再注文字
引线一般要用直尺画实线来表示,要求细直、均匀、不交叉(从左向右引线)标注可直接用文字也可用数码,再在图下集中注明,图下须注明标本的名称、部位(根、叶)和放大倍数。
用直尺量出画在纸上的图像的长度或大小
放大倍数=————————————————————————————— 用显微镜目尺量出被测观察物在同一方向上的实际长度或大小 (2) 徒手绘图法的步骤
① 选择最典型的标本或结构
② 仔细观察各部位的形状和结构及其之间的比例关系和较明显的立体结构 注意:皮层、木质部、韧皮部、髓各部分所占的比例(先画表皮或木栓,再画形层成)
③ 用HB或2H铅笔绘图所有全部作业全都用铅笔来完成。 注意:
①准备一本实验记录本,填写内容、方式 ②每次实验结束后,认真填写实验室日志, 三.作业
1. 将通用的代表符号绘制下来
2. 绘一张根类横切面徒手切片组织简图 3. 绘一张表面制片图
显微测微尺的使用和粉末制片法
一.实验目的
1. 掌握显微测微尺的校正和使用方法 2. 掌握粉末制片方法 二.实验内容:
(一)显微测微尺的校正和使用方法
1. 显微测微尺是用来测量显微镜下所见物体长度、大小的标尺,包括载台测微尺和目镜测微尺。
(1)载台测微尺(称台尺):为一特制的载玻片,在载玻片的中央封有1mm长的小尺,精确分成10大格,每大格又分10小格,每小格长度为0.01m,即10μm。载台测微尺(称台尺)并不直接用来测量显微镜下物体的大小,而是用以校正目镜测微尺的。经校正之后的目镜测微尺,方可用来测量显微镜下物体的大小
(2)目镜测微尺(简称目尺):为一直径约20mm的圆形玻片,玻片的中央部分具有一小尺10mm长,精确分成100小格。使用目镜测微尺时,将目镜自镜筒中抽出,旋开镜片,将目镜测微尺的标尺正面向上,安放在目镜中部的隔板上,旋上镜片,放回原镜筒内进行测量。.由于目镜测微尺每小格的长度随显微镜放大倍数而改变,故在使用前必须将各物镜头逐一用载台测微尺加以校正,以便确定在使用此显微镜时各组镜头下目镜测微尺每小格所代表的实际长度。 3. 目镜测微尺的校准
① 将台尺放在显微镜的载物台上,先用低倍(10倍镜)将测微尺清晰地调整到视野中央。
② 将目尺放入目镜内。
③ 找出二尺子的刻度重合线(左对齐向右最远端的重合线)。
根据二重合线间小格数的比值,计算低倍、高倍镜下每小格的数值(μm)即每小格的长度
注意:一般需测试次数,取其平均值。如果接物镜和接目镜的放大倍数改变,目镜测微尺应重新校正
载台测微尺的格数×每小格的长度 公式: 目镜测微尺=—————————————————— 目镜测微尺的格数

