loading1.【理化鉴别】
粉末或切片遇α-萘酚-浓硫酸试液显紫堇色（菊糖反应）．
（1）本品横切面：木栓细胞有时残存，不去外皮者有栓皮层，细胞中含草酸钙小棱晶。皮层窄，常见裂隙。韧皮部乳管群散在，壁略厚，内含微细颗粒状黄棕色物。形成层成环。木质部导管单个散在或数个相聚，呈放射状排列。薄壁细胞含菊糖。
（2）取本品，切片，用稀甘油装片，置显微镜下观察，可见扇形或类圆形的菊糖结晶。
（3）取本品粉末1g，加7％硫酸乙醇-水（1：3）混合液20ml，加热回流3小时，放冷，用氯仿振摇提取2次，每次20ml，合并氯仿液，加水30ml洗涤，弃去洗液，氯仿液用无水硫酸钠脱水，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取桔梗对照药材1g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法（附录Ⅵ B）试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-乙醚（1：1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。 2. 【化学成分】
根含多种皂甙，迄今已分得18种三萜皂甙，它们是；桔梗皂甙（platycodin）A、C、D[1]、D2、D3，去芹菜糖基桔梗皂甙（deapioplatycodin）D、D3、，2-O-=乙酰基桔梗皂甙（2-O-acetylplatycodin）D2，3-O-乙酰基桔梗皂甙（3-O-acetylplaty-codin）D2，远志皂甙（polyglalacin）D、D2，2-O-乙酰基远志皂甙（2-O-acetylpolygalacin）D、D2，3-O-乙酰基远志皂甙（3-O-acetylpolygalacin）D、D2，桔梗甙酸-A甲酯（methyl platyconate-A），2-O-甲基桔梗甙酸-A甲酯
（methyl-2-O-methyplatyconate-A），桔梗甙酸-A内酯（platyconic acid-A lactone）[2]，其中主成分是桔梗皂甙D，桔梗皂甙A又叫做2-O-乙酰基桔梗皂甙D，桔梗皂甙C又叫做3-O-乙酰基桔梗皂甙D。多种混合皂甙经完全水解所产生的皂甙元有：桔梗皂甙元（platycodigenin）[3]，远志酸（polygalacic acid）[4]，以及少量的桔梗酸（platycodigenin）[3]，远志酸（polygalacic acid）[4]，以及少量的桔梗酸（platycogenic acid）A、B、C[5]；如混合皂甙进行部分水解，则得到8种次皂甙（pros-aponin），它们在分离过程中是以甲酯形或分得的：3-O-β-D-吡喃葡萄糖基远志酸甲
酯（methyl 3-O-β-D-glucpyranosyl polygala-cate，3-O-β-昆布二糖基远志酸甲酯（methyl 3-O-β-laminaribiosyl polygalacate），3-O-β-D-吡喃葡萄糖基桔梗皂甙元甲酯（3-O-β-D=glucopyranosyl platycodigenin methyl ester）3-O-β-龙胆二糖基桔梗皂甙元甲酯
（3-O-β-gluctinobiosylplatycodi-genin methyl ester），3-O-β-D-吡喃葡萄糖基桔梗酸A内酯甲酯（3-O-β-D-glucopyranosyl platycogenin A lactone methyl ester）,3-O-β-D-吡喃葡萄糖基桔梗酸A二甲酯（dimethyl 3-O-β-D-glu-copyranosyl platycogenate A）,2-O-甲基-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基桔梗酸A 二甲酯（dimethyl
2-O-methyl-3-O-methyl-3-O-D-glucopyranosyl platycogenate A）[6].根还含白桦脂醇（betulin）,α-菠菜菜甾醇（α-spinasterol），α-菠菜甾醇-β-D-葡萄糖甙（α-spinasteryl-β-D-gluco-side）[2]。 3. 【含量测定】
取该品粗粉约4g，精密称定， 置索氏提取器中，加甲醇25ml，浸泡15小时后， 再加甲醇25ml，加热回流6小时， 放置过夜，滤过， 滤液置水浴上浓缩至15～2Oml，放冷， 加乙醚50ml，振摇摇， 放置至澄明，弃去上清液， 沉淀分次加甲醇（2Oml、10ml、5ml）加热使溶解，放冷， 滤过，合并甲醇液， 置水浴上浓缩至15～20ml，放冷， 加乙醚50ml，振摇， 同上法处理，合并甲醇液， 置已恒重的蒸发皿中，于水浴上蒸发至干， 在105C干燥至恒重，计算， 即得．该品含总皂苷不得少于6.0%．成分分析研究进展：略 4(1)桔梗多糖的提取、分离纯化和结构研究
. 桔梗(Platycodon grandiflorum(Jacq.)A.DC.)作为一种药食两用的中药材,在我国种植面积
广阔。药理研究显示桔梗多糖具有很好的抗肿瘤和增强机体免疫活性的作用,因此桔梗多糖(PGP)有很好的研究价值。本文以桔梗为模型,对桔梗多糖的含量测定、提取工艺、分离纯化、纯度鉴定及结构分析等方面进行了较系统的研究。现将研究方法与结论分述如下： 1、采用间接法测定桔梗多糖的含量。运用蒽酮-硫酸法测定桔梗总糖(包括多糖和还原性的单糖)的含量,分别采用3,5-二硝基水杨酸法(DNS)、间接碘量法、菲林滴定法测定还原糖的含量。总糖含量与还原糖含量之差即为多糖的含量。三种方法测得的桔梗多糖的含量分别为95.55%、96.01%、95.75%。结果显示三种方法测得的值相近,但是综合实验成本、设备、操作及影响测定的因素等多方面考虑,选用蒽酮-硫酸法与DNS法相结合测定桔梗多糖的含量。 2、采用传统的水煮醇沉法提取桔梗多糖,分别考察了提取温度、提取时间、料液比、提取次数对桔梗多糖提取率的影响,在单因素实验的基础上采用了四因素三水平正交试验来优化桔梗多糖的提取工艺。正交试验结果表明,桔梗多糖提取的最佳工艺条件为：提取温度为80℃,提取时间为2h,提取次数为2次,料液比为1：25。通过3次平行验证实验得出在该方案下桔梗多糖的提取率为42.51%。 3、采用Sevag法、三氯乙酸法、三氯乙酸-正丁醇法3种方法分别对桔梗多糖进行脱蛋白研究,以蛋白脱除率和多糖损失率为衡量指标,结果显示Sevag法除蛋白效果较好,其工艺条件为：多糖：氯仿：正丁醇=25：5：1,剧烈振摇20min。脱色方法采用H2O2氧化法,脱色条件为：多糖液：H2O2=4：1,以浓氨水或0.1%NaOH调pH值为8.8,37℃保温12h。采用Sephadex G-25柱层析法脱盐及小分子物质。 4、纯化后的桔梗多糖采用
DEAE-纤维素52进行分离主要得到三种组分：PGPN、PGPA1、PGPA3。三种组分经过Sephadex G-100柱层析进一步分离后均得到单一对称的洗脱峰。利用Sephadex G-100柱层析、旋光度测定法、紫外分光光度法对三种多糖进行纯度鉴定得出三种多糖都为均一的多糖,且都不含蛋白质和核酸。利用Sephadex G-200柱层析测得三种多糖的分子量分别为10233、4677、23442。 5、采用薄层色谱法(TLC)对桔梗多糖的单糖组成进行了分析,TLC图谱显示PGPN的单糖组成中含有果糖,还含有葡萄糖和半乳糖中的一种或者两种皆有；PGPA1是由半乳糖和果糖组成的；PGPA3是由半乳糖和木糖组成的。IR光谱显示PGPN的单糖是由呋喃糖和吡喃糖共同组成的；PGPA1的单糖也是由呋喃糖和吡喃糖共同组成的；PGPA3的单糖是由吡喃糖组成的,糖苷键类型为α-型,可能含有β-型糖苷键。1H-NMR图谱显示PGPN的糖苷键类型均为α-型,PGPA1糖苷键类型均为β-型；PGPA3的糖苷键类型既有α型也有β型。(2)
桔梗多糖的分离纯化及活性研究本课题通过单因素试验和四因素三水平
[L9(34)]的正交试验，确定了桔梗粗多糖的最佳提取方法，并在此基础上，用sevag法除蛋白杂质，透析袋除小分子杂质，利用柱层析法进一步分离纯化多糖，最终得到分子量均一的桔梗多糖PRPS-a，PRPS-b和PRPS-c. 本课题从体内和体外两个方面研究和探讨了桔梗多糖的抗哮喘活性。在体内实验中，以卵蛋白诱导的哮喘大鼠为模型，应用不同浓度的桔梗多糖进行干预，测定哮喘大鼠体内的炎性细胞、细胞因子和炎症介质含量的变化，进而观察桔梗多糖对哮喘大鼠的治疗作用。体外实验中，将桔梗多糖PRPS-a，PRPS-b，PRPS-c作用于ET-1致敏的人气道平滑肌细胞（HASMCs）增殖模型，观察它们对其增殖的作用。实验结果表明，桔梗多糖可显著抑制哮喘大鼠Eotaxin1和ICAM-1的表达，减少血液及气道内EOS数量及百分比，显著降低哮喘大鼠血清和BALF中IL-4含量，升高IFN-γ含量，并能够有效的抑制HASMCs的增殖。由此提示，桔梗多糖抗哮喘机制可能与其通过调节哮喘Thl/Th2失衡，进而影响细胞因子的分泌而抑制HASMCs的增殖，使之具有较强的抗哮喘活性有关。本课题以我国传统中药桔梗多糖为研究对象，在确定其提取分离和纯化工艺的基础上，较系统的研究了它们的理化性质及相关药效活性。实验结果表明，桔梗多糖具有抗哮喘活性依据国家科技部“重大新药创制”的理念，本研究结果，力求为建立中药药效物质基础及物质资源库提供桔梗较系统基础研究资料，为桔梗多糖成为防治哮喘有效药物，提供理论依据。 (3)