loading分子诊断在肿瘤诊断及个体化
治疗中的应用与进展
叶建伟吴阶平医学基金会分子医学中心肿瘤分子诊断策略& 检测平台的综合应用
肿瘤/个体相关基因变异染色体水平改变FISHDNA局部变异已知突变RNA表达水平差异蛋白质表达差异未知突变实时定量PCR等IHC/ELISA广泛分布局部突变>20%
低含量
DHPLC测序实时荧光PCR等多层次检测平台的综合应用
分子生物学技术Clinical Cancer Research 2007; 13(17): 4954-5其他分子生物学技术：DHPLC+后荧光、突变富集PCR+DHPLC后荧光、突变富集PCR
+RFLP+DHPLC后荧光、突变富集PCR+直接测序……
细胞生物学技术：FISH、FACS
蛋白质组学技术：IHC、ELISA、蛋白质指纹图谱
不同检测水平的综合应用
中心法则：
DNARNA蛋白质经典检测方法与结果示例直接测序
? DNA提取? PCR扩增? 测序EGFR exon19
c.2231del (CAAGGAATTAAGAGAAGC) 18bp
? 优势：直接获取已知/未知DNA突变信息，准确可靠。金标准！? 局限性：检测肿瘤组织的DNA变异时，最高灵敏度为20%。? 适用范围：个体遗传学背景检测
大部分肿瘤组织、体液中肿瘤脱落细胞DNA变异检测