DIG试剂盒说明书(CSPD)中文翻译版

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只用于生命科学研究,不能用于诊断程序 仅用于体外实验

DIG High Prime DNA Labeling and Detection Starter Kit Ⅱ 采用地高辛-dUTP进行随机引物DNA标记,碱性标记,利用CSPD化学发光检测,随时即用。 货号:11 585 614 910

此试剂盒储存条件:-15℃到-25℃。

此试剂盒可对10ng-3μgDNA进行12次标记反应, 可检测10×10cm2面积的杂交膜24张。

指导手册 2005.12 版 1 前言 1.1 内容表 1 前言 1.1 内容表 1.2 试剂盒成分 2.介绍 2.1 产品简介

3. 操作步骤和所需材料 3.1 在你开始前 3.2 流程图

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3.3 地高辛标记DNA 3.4 标记效率的确定 3.5 DNA的转移和固定 3.6 杂交 3.7 免疫检测

3.8 DNA印记的洗脱和再杂交 4. 附录 4.1 故障排除 4.2 参考文献 4.3 订购信息 1.2 试剂盒的成分

内容 瓶号 标记 包括功能 50μL 地高辛标记的高效引物 5×浓度的标记混合物:优化的浓度的随机引物,核苷酸,地高辛标记的dUTP(碱1 DIG-高效引物 标记的),Klenow酶和缓冲液成分 随时可用 澄清的粘液 用于DNA的高效随机引物标记 2

20μL 5μg/mL 质粒pBR328 DNA (用Bam HIDIG标记的对照2 DNA 澄清溶液 用于确定标记效率 3管1mL 50μg/mL鱼精DNA,10mM Tris-HCl,1mM 3 DNA稀释缓冲液 EDTA, pH8.0 在25℃ 澄清溶液 50μL 750U/mL 抗地高辛的碱性4 磷酸酶结合物 从羊中获取的,Fab段,结合碱性磷酸酶 澄清溶液 50mL CSPD 澄清溶液 4×100mL 线性化) CSPD 5 随时可用 6 封闭液 3

10×浓度 黄色,粘液 100mL地高辛杂交液共4瓶,用于DNA7 地高辛杂交颗粒 杂交

附加仪器与所需试剂

除了上表中列出的试剂外,你必须准备一些溶液。在下表中,你可以找到不同操作程序需要准备的设备概要。

在每个操作程序的前面提供了详细的信息。 操作程序 3.3 DIG-DNA标记 水浴 仪器设备 试剂 灭菌的双蒸水 0.2M pH8.0 灭菌的EDTA 3.4 标记效率的半定带正电荷的尼龙膜* 量 地高辛洗涤和封阻缓冲组合*或者 洗涤缓冲液 马来酸缓冲液 检测缓冲液 4

3.5 DNA转移和固定 紫外光盒 20×SSC 或者商业化可用于紫外或者10×SSC 交联的其他设备 3.6 杂交 尼龙膜,带正电荷* 杂交袋*, 或者耐热的塑料袋或者滚筒瓶 注意:当用地高辛杂交缓冲液工作时,不要用开口的托盘。 3.7 免疫检测 耐热的塑料袋或者滚筒地高辛洗涤和封阻缓冲瓶 杂交袋* 液组合*,或者 洗涤缓冲液 马来酸缓冲液 检测缓冲液 3.8 DNA 斑点的脱色大的托盘 和重新标记探针 水浴 10×SSC 10%SDS 0.2M NaOH

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