前言(宋体、四号、加粗)
前言应保证300字左右,简要介绍研究的背景(新领域的研究主题、国内外研究进展、目前该领域尚未解决的问题等)、研究的意义及主要方法等,并逐渐过渡到本文的研究思路,说明既往研究结果与本研究的关联性或承接性。
注意:正文中首次出现的缩写词应写出其中英文全称及缩写形式,如:“肝细胞肝癌(Hepatocellular carcinoma, HCC)”。
1 材料与方法(一级标题,宋体、四号、加粗)
该部分主要描述研究过程中实验对象的基本信息(注意选择合理的具有统计学意义的数量)、实验材料(注明购买地点或产地)、试剂(注明试剂纯度和纯化方法)、仪器(注明型号、国家、生产商)、设备(注明主要设备和关键配件)、实验条件、实验技术及方法等。实验步骤要叙述准确,文字表达要符合逻辑,做到上下文统一,语言简洁明了,以利于其他研究人员能够重复实验。对于新方法或新技术应该详细描述,而对于已知成果的改进或改良则只需描述其改进之处即可。以下范文书写格式可做参考:
1.1 材料(二级标题,宋体、小四、加粗)
例:
人肝癌细胞HepG2由中国科学院肿瘤医院提供;胎牛血清购自Gibco公司;二氯乙酸钠(DAC);DMEM及0.25%胰酶Trypsin购自美国Invitrogen公司;EDTA、PS(青霉素+链霉素)、四氮唑蓝(MTT)、二甲基亚矾(DMSO)及TRIZOL购自美国Invitrogen公司;氯仿、酒精(浓度为75%)及逆转录试剂盒购自美国ABI Applied Biosystems公司;Annexin V/PI双染色流式法细胞凋亡检测试剂盒购自Bender公司;光学显微镜、流式细胞仪、全自动酶标仪(BIO-RAD550)及Real-time PCR仪购自美国bio-rad公司。
1.2 方法(二级标题,宋体、小四、加粗)
例:
1.2.1 细胞培养(三级标题,宋体、五号、加粗) 配制含15%胎牛血清(FBS)+DMEM培养基+1%PS的培养液。在液氮罐中取出HepG2冻存管,迅速放入37 ℃水浴箱中复温解冻,在超净台中吸取10 ml培养液加入离心管中,待HepG2解冻后,用吸管吸出解冻液,加入离心管中,吹打混匀,密封后置离心机中离心(800 r/min,5 min),弃上清,加入配制好的培养液适当稀释,移入培养瓶中,于37 ℃ 5%CO2培养箱中常规培养。隔天换液,当HepG2生长融合成单层时,用PBS洗涤三遍,再用0.25%胰酶-0.02íTA消化传代。
1.2.2 实验分组(三级标题,宋体、五号、加粗) 将传代好的HepG2分为九组,分别加入浓度为0 mmol/L(对照组);1.0 mmol/L,2.0 mmol/L,4.0 mmol/L,8.0 mmol/L(乳酸组);1.0 mmol/L+DCA,2.0 mmol/L+DCA,4.0 mmol/L+DCA,8.0 mmol/L+DCA(DCA组),DCA终浓度为10-3 mmol/L,培养液共同培养24 h。
1.2.3 四氮唑蓝(MTT)比色实验(三级标题,宋体、五号、加粗) 将HePG2细胞悬液浓度调整为5×l07/L,每孔200 μL接种于96孔板上,各组分别加入不同浓度的乳酸,对照组不加药,另设空白对照孔(只加培养基,无细胞),每组设8个重复孔。继续培养24 h后,加人MTT(5 g/L)20 μL,放置孵箱内培养4 h后弃上清,加人二甲基亚矾(DMSO)200 μL,振荡15 min,用全自动酶标仪(BIO-RAD550)检测490 nm(参考波长630 nm)处的吸光度值(A值)。抑制率(%)=(A对照-A实验)/A对照×100%。
1.2.4 流式细胞仪测定细胞凋亡(三级标题,宋体、五号、加粗) 取各组细胞,分别用0.25%胰酶-0.02íTA消化30 s,PBS洗涤后加入配制好的培养液制备成单细胞悬液,用细胞计数器调整每组细胞数为5×106/ml,取1 ml细胞悬液于离心管中,置于离心机中800 r/min离心5 min,弃上清;PBS洗涤后轻轻振荡使细胞悬浮,反复离心洗涤后,取250 μL细胞悬液,加入Annexin V-FITC 10 μL和PI 5 μL,混匀后室温下避光孵育15 min后上机待检。
1.3 统计学分析(二级标题,宋体、小四、加粗)
研究型论文必须有统计学分析,注明所采用的统计学软件及版本号、检验方法及检验水准等。
2 结果(一级标题,宋体、四号、加粗)
应详细说明研究得到的真实数据或观察到的实验现象,并辅以图或表补充说明。 例:
2.1 各组大鼠心肌细胞凋亡情况的比较(二级标题,宋体、小四、加粗)
模型组大鼠AMI出现大量区心肌细胞凋亡,凋亡细胞数显著多于假手术组(P<0.001),而OMT预处理使AMI大鼠的心肌细胞凋亡数显著减少(P<0.001),在假手术组组与OMT预处理+假手术组中仅发现极少量的凋亡细胞存在。见图1。
图1 各组大鼠心肌细胞凋亡情况的比较
Fig.1 Comparison of the apoptosis of rat myocardial cells among different groups
Note: Data are expressed as
x±SD, n=6. ***P< 0.001, compared with group Sham; ### P< 0.001,
compared with AMI group.
例:
2.2 胃癌细胞SGC7901的凋亡情况(二级标题,宋体、小四、加粗)
流式细胞仪检测肿瘤细胞凋亡的结果显示,治疗组、阴性对照组及对照组胃癌细胞凋亡率分别为(22.28±0.12)%、(1.23±0.17)%和(1.03±0.14)%。治疗组与阴性对照组和对照组比较差异都有统计学意义(t=18.152,17.555,P<0.05)。见表1。
表1 三组胃癌SGC7901细胞凋亡情况(%,x±s)
Table 1 Apoptosis of cells in the gastric cancer SGC7901 of the three groups
Groups Treatment Group Negative Control Group Control Groups
Amount(n) 8 8 8
Apoptosis Rate 22.28±0.12#* 1.23±0.17 1.03±0.14
Note: compared with the negative group, #t=18.152; compared with the control group, *t=17.555, P<0.05.
3 讨论(一级标题,宋体、四号、加粗)
对研究结果进行具体的总结,应准确、简明、完整的分析各指标的意义,评价结果存在的误差,结合相关文献进行比较,说明结果产生的可能原因,强调本研究对该领域的意义以及后续研究需要注意的方面等。简要介绍下一步研究思路,进一步提出新的问题,并对该领域的研究进行展望。
参考文献(References)(五号、宋体&Times New Roman、加粗)
本刊要求参考文献一律使用英文书写,中文文献必须写出其相应的英文翻译;若原著为中文撰写,需在英文刊名后注明其中文名称。
例:
[1] Li Hua, Cao Wen-yu, Xu Yang, et al. Inflammatory pain induced CBP expression change in rat hippocampus[J]. Chinese Journal of Clinical Anatomy(中国临床解剖学杂志), 2011, 29(5): 546-549
[2] Malheiros JM, Lima M, Avanzi RD, et al. Repetitive noxious neonatal stimuli increases dentate gyrus cell proliferation and hippocampal brain-derived neurotrophic factor levels[J]. Hippocampus, 2014, 24(4): 415-423
[3] 韩刚, 王以东, 曹羽, 等. 直肠癌腹腔镜与开腹根治术的近远期疗效及安全性评估[J]. 现代生物医学进展, 2013, 13(8): 1511-1513+1553
Han Gang, Wang Yi-dong, Cao Yu, et al. Study on the Short-Term and Long-Term Effect and Safety of Laparoscopic Versus Open Radical Resection for Rectal Cancer[J]. Progress in Modern Biomedicine, 2013, 13(8): 1511-1513+1553