秀丽高原鳅繁殖生物学研究
秀丽高原鳅属于硬骨鱼纲、鲤形目、鳅科、高原鳅属鱼类,属于云南省特有鱼类,分布于大理州鹤庆县黑龙潭、白龙潭、西龙潭等自然水域,其味道鲜美,深受产地居民喜爱。近年来,由于自然干旱及水系水利水电工程建设等自然和人为因素影响,秀丽高原鳅野外种群生存面临严峻挑战,其基础繁殖生物学研究尚属空白,亟需进行相关研究,以期为人工干预秀丽高原鳅繁殖提供必要的生物学积累。 1 材料和方法
1.1 性成熟年龄与繁殖力
于2021年4月至2021年3月不间断采样,对34尾样本进行活体解剖并目测观察性腺发育形态,进行分期(Ⅰ~Ⅵ期),记录相应的数据以备分析;参照文献[3-5],确定微耳石作为年龄鉴定材料;将相对应样本带回笔者实验室解剖镜下提取微耳石,经环保透明液透明,中性快干胶载玻片包埋干燥,用7 000目砂纸磨片后,顯微拍照以备年龄鉴定。
繁殖力以雌性鱼类的怀卵量表示,分为个体绝对繁殖力(绝对怀卵量)和个体相对繁殖力(绝对怀卵量/空壳质量),对秀丽高原鳅样本Ⅳ期或Ⅴ期卵巢计数单位质量卵粒,取成熟期卵巢称性腺质量,截取前、中、后部的卵巢组织称质量,5%福尔马林固定后,分别计数并求平均数(粒/g),再乘以卵巢总质量,获得个体绝对怀卵量;将性腺及内脏去除,称质量,获得空壳质量,以计算个体相对怀卵量;并计算成熟系数(性腺质量/空壳质量×100%),以表示1个种或种群的繁殖力。
1.2 性腺发育周年变化
2021年4月至2021年4月,逐月于云南省大理州鹤庆县仕庄龙潭,采用地笼采集秀丽高原鳅活体样本,进行活体解剖,目测性腺发育,记录66尾雌鱼卵巢的形态和大部分卵细胞的发育概况,随机抽
取部分性腺样本,性腺样本组织经甲醇固定、乙醇逐级脱水、二甲苯透明、熔蜡中浸蜡、熔蜡模具包埋、leica切片机切片、温水展片、载玻片贴片、苏木精-伊红染色、中性快干胶盖玻片封固等步骤,获得HE染色的组织切片,于NIKON Eclipse 50i正置显微镜观察。 1.3 数据分析
样本试验数据通过Excel 2007、SPSS 17.0处理分析。 2 分析与讨论
2.1 性成熟年龄与繁殖力
雌性鱼类卵巢在Ⅰ期时,成一条细线,雌雄难辨,当发育到Ⅳ期时,卵粒大量沉积卵黄,形态饱满,卵巢充满大部分腹腔,卵巢质量达到顶峰,但还不能产卵,此时达到性成熟。精巢呈乳白色,但还不能排精,稍用力轻挤有精液流出。
由表1可知,年龄与性腺发育对应样本同龄鱼中,因同龄样本采集时间月份不一样,发育阶段不同,导致性腺发育存在一定差异。 图1为对应样本中各年龄的数量组成,样本显示秀丽高原鳅种群主要为2~3龄鱼,样本种群处于成长期,低龄鱼类为优势种群鱼类,属于增长型种群结构,得益于样本采集地良好的水生生态环境,以及较弱的捕捞强度。
由图2可知,在样本中鉴定出的2~6龄鱼,发育到Ⅳ和Ⅴ期的性腺出现率为100%,即秀丽高原鳅2龄即可达到性成熟,样本中性成熟个体达到50%,且随着年龄增长,同龄个体达到性成熟的概率相对增大,性成熟有多方面的影响因素,除自身机体神经-内分泌调控外,营养影响是重要的因子,通過对秀丽高原鳅进行活体解剖观察胃部发现,充塞度达到2级以上的,均能发现钩虾(Gammarus sp.),钩虾蛋白质含量可达40.01%,钙、磷含量分别达到6.88%和6.44%,富含甲壳素,摄食钩虾可使体色艳丽[7-9],从样本采集地寺庄龙潭调查发现,生境中钩虾种群旺盛,为秀丽高原鳅提供了丰沛的动物源性饵料,促进了秀丽高原鳅的性腺发育,低龄鱼中性成熟期胸腹部形态异常膨大。
样本个体绝对繁殖力平均为1 928粒,数量介于233~6 971 粒,其频率分布见图3。
个体相对繁殖力平均为420粒/g,比值介于43~1 211粒/g,其数量分布频率见图4。
性腺成熟系数平均为10.63%,介于1.50%~24.60%,其分布频率见图5。
性成熟的雌性秀丽高原鳅样本中,其性成熟最小型为生殖群体中最小性成熟雌鱼体长5.1 cm、空壳质量1.4 g、成熟系数14.20%,与已知的同属贝氏高原鳅性成熟最小型基本指标一致。但样本总体平均明显低于其平均水平33.31%;同样也低于叶尔羌高原鳅性成熟系数17.30%。
样本中绝对繁殖力平均显著少于贝氏高原鳅(2 519粒),同时少于叶尔羌高原鳅(28 716粒),以及相对繁殖力也显著低于贝氏高原鳅(540.61粒/g),同时低于叶尔羌高原鳅(2 310粒/g)。 秀丽高原鳅成熟系数较低,根据成熟系数以衡量性腺发育程度和鱼体能量在性腺和躯体之间比例的重要指标来看,秀丽高原鳅个体小,但由于生境水温较低(生境与钩虾饵料丰度一致),即使饵料丰富,产地生境保护完善,亲体的能量也只能以一定的比例转化为性腺,也是对良好生境的进化适应。 2.2 卵巢发育周年变化
Ⅰ期卵巢相连为一个整体,分别贴于腹腔内壁左右,细线状难以辨别雌雄:
(1)Ⅱ期卵巢扁带状,肉眼尚看不清卵粒,为性腺正发育中的性未成熟或产后恢复阶段。
(2)Ⅲ期卵巢:卵巢体积较大,肉眼可看清卵粒,但卵粒还难以从卵巢隔膜上分离剥落,卵黄开始沉积。
(3)Ⅳ期卵巢:整个卵巢很大,占据腹腔的大部分空间,卵巢呈淡黄色或深黄色,血管十分发达,卵巢膜具有弹性,卵粒内充满卵黄,大而饱满。