植物组织培养

loading 分享 2026-8-23 下载文档

试验性培养基,从 25 个培养基中挑选出最好的培养条件(2) 进一步选择最合适的生长素和细胞分裂 素(浓度均与最适条件浓度相同)方法是先保持其中的生长素不变。只改变细胞分裂素的类型,反之亦 然。

虽然高盐培养基(MS 等)从许多植物系统中已证明是良好的,但是有些培养物在低盐培养基 上生长得更好,因此值得花精力去检验一下在最适生长调节剂组合下改变 MS 的无机盐浓度为 1/2 和 1/4 水平,从而可以找到最好的无机盐尝试和最适生长调节剂组合的营养培养基。 三.培养基母液配制

为了减少工作量,减少多次称量所造成的误差,一般将常用药品配成比所需浓度高 10—100 倍 的母液,现以 MS 培养基为例,预先配制,四组不同母液,说明母液的配制方法。

实验四

MS 培养基母液的配制

一、目的要求

通过 MS 培养基母液的配制与保存,掌握配制与保存 MS 培养基母液的基本技能。 二、实验安排

分组进行,每组完成一种母液的配制工作,共同完成一批母液的配制。 三、材料与用具

配制 MS 培养基母液所需要的药品、生长调节物质、各类天平、烧杯、定容瓶、量筒、药勺、 小玻璃棒、蒸馏水、95%的酒精或 0.1mol/L 的 NaOH、0.1mol/LHCL、母液瓶、标签、冰箱。 四、方法步骤

(一)MS 培养基母液配制(单位:毫克 mg)

母液 编 种 成 分 规定量 浓缩 称取量 母液 配制 1 升培 养基吸取量 定容 倍数 体积 号 类 大 KNO3 量 NH4NO3 元 MgSO4·7H2O 素 KH2PO4 CaCl2·2H2O 1900 1650 370 170 440 22.3 8.6 6.2 0.83 0.25 0.025 0.025 37.3 27.8 2.0 0.5 0.1 0.5 100 10 10 10 10 10 100 100 100 100 100 100 100 100 100 50 50 50 50 50 19000 16500 3700 1700 4400 2230 860 620 83 25 2.5 2.5 3730 2780 100 25 5 25 5000 I 1000 100 MnSO4·4H2O ZnSO4·7H2O 微 H3BO3 量 KI 元 Na2MoO4·7H2O 素 CuSO4.5H2O4 CoCL2.6H2O II 100 10 铁 Na2-EDTA 盐 FeSO4.4H2O 1000 10 甘氨酸 III 有 盐酸吡哆醇 机 盐酸硫铵素 物 烟酸 肌酸 500 10 注意:1.大量元素按照使用时浓缩 10 倍的数值称取,分别将各种化合物称量后,除CaCl2·2H2O 单独配制外,其余化合物混合在 500ml烧杯中加适量蒸馏水溶解,用玻璃棒搅拌促溶,倒入 1000ml 容量瓶中用蒸馏水定容至刻度,置小口瓶中保存,贴上标签注明化合物名称(或编号),浓缩倍数, 配制日期和配制者姓名,CaCl2·2H2O配制同上置于另一小口瓶中。 2.微量元素母液的配制

按要求浓缩 100 倍的数值称取,分别将各种化合物称量除铁盐(FeSO4·7H2O和Na2-EDTA.2H2O)

作为一组单独配制外,其余化合物可混合置于烧杯内加少量蒸馏水溶解后,定容在 1000ml容量瓶中, 置小口瓶中保存,贴上标签。

3.铁盐配制将FeSO4·7H2O和Na2-EDTA.2H2O分别溶于 450ml蒸馏水中,加热,不断搅拌,溶解后, 两液混合,调pH至 5.5 加水定容至 1000ml,置于小口瓶中,贴上标签。 4.有机物母液配制,按母液要求浓缩 100 倍,除蔗糖按 3%单独临时称量外,其余分别称量后,溶 解,定容在 500ml 容量瓶中,置于小口瓶中保存,贴上标签。

5.母液最好在 2~4℃的冰箱中贮存,特别是有机类物质,贮存时间不宜过长,无机盐母液最好在一 个月内用完,如发现有霉菌和沉淀产生,就不能再使用。

6. 制备母液和营养培养基时,所用蒸馏水或无离子水必须符合标准要求,化学药品必须是高纯度

的(分析纯)。

7. 称量药物采用高灵敏度的天平,每种药品专用一药匙。 五. 作业

(1)将本次实验内容整理成实验报告。

(2)能不能把所有的母液置于一个瓶里,当作一种母液用于配制?为什么? (3)在配制大量元素母液时,CaCl2为什么要单独配制?

(4)已知大量元素的母液浓度是原配方浓度的 10 倍,在配制 1000mlMS 培养基时应取多少毫升母 液?

(5)MS 培养基中需加入 0.5mg/L 的 6-BA,当母液浓度为 0.1mg/ml 时,配制 1000ml 培养基需要取 多少 ml6-BA 母液?


植物组织培养.doc 将本文的Word文档下载到电脑
搜索更多关于: 植物组织培养 的文档
相关推荐
相关阅读