液相养护标准操作规程
1、泵相分配原则
Waters液相色谱仪:AB泵使用水相,CD泵使用有机相。 Agilent液相色谱仪:AD泵使用水相,BC泵使用有机相。
2、实验开始前色谱系统的冲洗
2.1 所使用的流动相中不含缓冲盐,可使用纯甲醇或纯乙腈以1ml/min冲洗管路10-20min后再使用所需使用的流动相进行基线平衡。
2.2 如所使用的流动相中 含有缓冲盐,应使用5-10%的甲醇/乙腈水溶液冲洗管路30min后再使用所需使用的流动相进行基线平衡。
3、实验完毕后色谱系统的冲洗 3.1流动相中不含缓冲盐的系统冲洗
所使用的流动相为甲醇/乙腈-纯水系统时,关闭检测器灯,保持原条件继续冲洗20倍柱体积,后再换成纯甲醇或纯乙腈冲洗,以流速1ml/min冲洗30min即可。
所使用的流动相为甲醇/乙腈-非纯水系统时且不含缓冲盐时,关闭检测器灯,将原水溶液换成纯水,保持原条件继续冲洗30min后再换成纯甲醇或纯乙腈,以流速1ml/min冲洗30min即可。 3.2流动相中含有缓冲盐的系统冲洗
如所使用的流动相中含有缓冲盐,关闭检测器灯,保持原柱温,使用5-10%的甲醇或乙腈水溶液冲洗至少30min后再换成纯甲醇或纯乙腈以流速1ml/min冲洗30min即可。
4、小长假或长期不使用仪器的系统冲洗。
4.1 小长假或长期不使用仪器,在关闭仪器前应使用纯甲醇以1ml/min流速冲洗系统至少30min,冲洗完毕后,关闭电源,用不锈钢两通代替色谱柱,色谱柱取下后正确安装堵头,放入对应盒子或位置。
4.2小长假或长期不使用后需重新使用仪器,开机后待仪器自检通过后,使用新配置的甲醇以1ml/min流速将整个系统冲洗不少于10min后,安装所需使用的色
谱柱,以1ml/min流速的纯甲醇再冲洗整个管路30min后,再换上实验所需的流动相进行系统平衡。(注:如所使用的流动相中含有缓冲盐,需使用5-10%的甲醇/乙腈-水冲洗管路30min后再换上实验所需的流动相进行系统平衡。) 4.3 如长期不适用仪器,应定期(一般为半个月)使用新配置的甲醇以1ml/min流速开机冲洗管路30min。
4.4 小长假或长期不使用仪器,过滤头应放在甲醇中或取出装于洁净惰性袋子中。
5. 过滤头不应长时间放置在纯水或水溶液中,应放置在纯甲醇或纯乙腈中。
6. 洗针液一般使用50%甲醇或10%异丙醇水溶液,每周一换。亦可根据实验所使用的流动相比例每次新配置。
7. 柱塞杆密封垫清洗液为10%甲醇/乙腈水溶液,每周一换。
8. 检测器间断小于两小时的不需要关闭检测灯。
9. 流动相瓶应经常擦洗,避免内部有污垢积留。
10. 含缓冲盐的的流动相应使用0.45um过滤膜过滤至少两遍。非含缓冲盐的流动相应至少过滤一遍。
11.仪器外表应经常擦拭,避免灰尘大量堆积。