loadingTLR2和TLR4在牛型结核分枝杆菌诱导的肾小管上皮细胞损
伤中的作用*
林洪升1， 杨海波1△， 谢恺庆2△, 杨 利1， 周静文2， 周马林1， 黄企光1
【摘 要】[摘 要] 目的： 探讨Toll样受体(TLR)2和TLR4在牛型结核分枝杆菌卡介苗(BCG)诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2细胞)损伤中的作用。方法: 用BCG刺激HK-2细胞，通过荧光定量PCR和Western blotting方法分别检测TLR2、TLR4、转化生长因子β1(TGF-β1)和趋化因子CX3CL1的表达。将TLR2抗体和TLR4拮抗剂CLI-90分别与BCG共刺激HK-2细胞，通过荧光定量PCR和Western blotting方法分别检测TGF-β1和CX3CL1的表达水平。结果: BCG刺激HK-2细胞可诱导TLR2、TLR4、TGF-β1和CX3CL1表达上调，TLR2抗体和TLR4拮抗剂可部分抑制BCG引起的TGF-β1和CX3CL1表达上调。结论: BCG可通过激活TLR2和TLR4引起TGF-β1和CX3CL1表达上调，提示TLR2和TLR4介导的信号通路在结核分枝杆菌致肾小管上皮细胞损伤中发挥重要作用。【期刊名称】中国病理生理杂志【年(卷),期】2014(000)006【总页数】8
【关键词】[关键词] Toll样受体类； 肾小管上皮细胞； 牛型结核分枝杆菌
结核病是世界范围内严重威胁人类健康的疾病之一，在2012年全球新增感染人数约860万，死亡人数为130万。泌尿生殖系统结核作为仅次于淋巴结核的肺外结核，其中又以肾结核多见。研究表明，在受到病原微生物感染时，肾小管上皮细胞可通过释放细胞因子、募集炎症细胞启动局部炎症和免疫反应，同时肾小管上皮细胞还可以转分化成为兼职免疫细胞表达Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)，参与炎症和免疫的调控作用[1]。TLRs作为一种重要的模式识别受体，是联系先天性免疫和获得性免疫的重要蛋白[2]。在参与识别结核分枝杆菌及其衍生物和促发炎症和免疫应答过程中，又以TLR2和TLR4为主[3-4]。但是在肾结核发病过程中，结核分枝杆菌是否通过活化TLR2和TLR4途径诱导肾小管上皮细胞的损伤而参与肾小管间质炎症和纤维化过程，目前仍不清楚。因此，我们通过体外实验验证牛型结核分枝杆菌卡介苗(Bacillus Calmette-Guérin, BCG)对人肾小管上皮细胞(HK-2细胞)TLR2和TLR4表达的影响，探讨BCG 刺激TLR2和TLR4活化后对HK-2细胞的损伤作用及其生物学效应。
材 料 和 方 法
1 菌株与细胞株
BCG由广西医科大学微生物教研室提供；人近端肾小管上皮细胞株HK-2购于ATCC。2 主要试剂和仪器