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〔 16〕 采用 ELISA 法对人血浆中大豆黄素和其代谢物 equol 进行测定, 其中大豆 黄素和 equol 分析缓冲液检测限分别为 21pg/孔、 70pg/孔。大豆异黄酮作为 – 种具有特殊生理功能天然活性物质,其独特功效和利用潜力近年获得世人极大 关注, 开发利用大豆异黄酮作为保健食品或美容用品基料和添加剂前景广阔。 高 效检测方法是大豆异黄酮研发基础, 目前应用检测方法具有不同特点及使用范围, 研究者可根据不同检测需要加以选择。寻求 – 种简便、高效、快速、成本低廉检 测大豆异黄酮方法仍是科研人员今后继续研发方向。
3.3放射免疫测定法
放射免疫测定法是 – 种高灵敏度、快速高效的测定方法。肠 pciko 等对大豆 黄酮进行放免法测定 , 该试验是在单克隆抗体与大豆黄酮 –4–O–(梭甲基 – 乙基 – 牛 血清白蛋白反应的基础上建立的。除 4– 大豆黄酮的衍生物外 , 二氢大豆黄酮、染 料木素、 生原禅宁 (biochanin A 和雌马酚 (e-quol与单克隆抗体的交叉反应几率分 别为 2.4%、 1.3%、 1.5%和 1.6%。
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各检测方法系统归纳和分析
附:各国际组织采用的检测方法及标准
美国分析化学家协会 AOAC 公布的大豆及大豆食品中异黄酮的测定方法分为 提取、 皂化和 HPLC 测定 3个过程。 测试样品用甲醇 -水提取液 (V(甲醇 :V(水 =80: 20 在 65℃提取 2h 。提取物在室温下用氢氧化钠溶液皂化 , 之后进行酸化 , 过滤。 滤液用甲醇 -水 (V甲醇:V(水 =50:50 进行稀释。提取物离心澄清并通过 HPLC 法进行分析测定。异黄酮葡萄糖苷和苷元在 C18反相柱上以甲醇 -水为流动相分 离 , 在紫外 260nm 处检测。 通过计算 , 结果以异黄酮苷元和相应葡萄糖苷形式的苷 元等价物 (均以苷元为单位 的含量表示。
中国国家标准 GB/T26625-2011规定了利用高效液相色谱法测定大豆异黄酮 (大豆甙、黄豆黄素、染料木甙、大豆黄素、黄豆黄素甙元、染料木素含量的 原理、 试剂与材料、 仪器与设备、 试剂制备与保存、 操作步骤、 结果计算与表
示、 精密度的要求。适用于大豆、豆奶粉、豆豉中大豆异黄酮含量的测定。最低检测 限为 2.5mg/kg。
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