生化分离技术原理及应用复习提纲

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《生物分离工程》

复 习 题

1、 什么是等电点沉淀?

调节溶液的 pH至溶质的等电点,溶质所带净电荷为零时,其分子间的吸引力增加,分子相互吸引,把该溶质从溶液中沉淀出来,即等电点沉淀 2、 什么是微滤?

微滤(micfiltation,MF)是以多孔细小薄膜为过滤介质,靠膜两侧的压力 差来对物质进行选择性透过,达到膜分离的目的。微滤膜的孔径分布范围在0.05? 10um之间;采用的压力一般在0.05?0.5MPa范围内。 3、 什么是超滤?

超滤(ultafiltationUF)是利用膜两侧的压力差为动力将分子有选择地透 过膜的过程,透过膜的分子除溶剂水外,还可以将溶质中的小分子(如无机盐等) 通过膜,因此它属于一种“膜分离”过程。超滤的分离介质与微滤膜类似,但孔径 更小,为0 001?0.05um,采用的压力常为0.1?1.0MPa。 4、 什么是反萃取?

反萃取(backextraction):将萃取液和反萃取剂(含无机酸或碱的水溶液、 水等)相接触,使某种被萃取到有机相的溶质转人水相,可看作是萃取的逆过程。 5、什么是溶剂萃取

溶剂萃取:利用物质在互不相溶的两相溶剂中溶解度的不同,将物质从一相溶剂 转移到另一相溶剂中,从而进行分离、浓缩和提纯目的产物的方法. 6、什么是色谱技术?

色谱技术是一组相关分离方法的总称,色谱柱的一般结构含有固定相和流动相,根据物质在两相间的分配行为不同,经过多次分配(吸附-解吸-吸附-解吸…),达到分离的目的。 7、什么是膜分离技术?

膜分离技术利用膜的选择性(孔径大小),以膜的两侧存在的能量差作为推动力,由于溶液中各组分透过膜的迁移率不同而实现分离的一种技术。

8、什么是生化分离技术?

生化分离技术是指从发酵液或酶中,分离纯化生物产品的过程。它是生物技术转化为生产力不可缺少的重要环节,又称为生物技术下游加工技术。 9、发酵产品预处理特点?

利用微生物发酵生产各种发酵产品,由于菌种不同和发酵醪特性不同,其预处理方法和 提取、精制方法的选择也有差异。 10、沉淀分离技术分类?

沉淀分离技术包括盐析沉淀、等电点沉淀、聚合物沉淀和有机溶剂沉淀等技术。

11、色谱技术如何根据固定相的形状分类 ?

色谱技术根据固定相的形状不同可分为柱色谱法和薄层色谱法。 12、根据电泳原理,电泳分离系统分为哪几种?

依据电泳原理,现有三种形式的电泳分离系统移动界面电泳、区带电泳、稳态 电泳,其中区带电泳是目前常用的电泳系统。区带电泳中的常用技术分载体电泳和

无载体电泳,载体电泳包括:粉末电泳、纸电泳 、凝胶电泳、聚焦电泳;无载体 电泳包: 自由电泳、毛细管电泳。

13、在有机溶剂沉淀中,作为沉淀剂的有机溶剂选择原则?

在有机溶剂沉淀中,选择作为沉淀剂的有机溶剂的原则:能与水互溶;不与蛋白 质发生反应;具有较好的沉淀效应; 溶剂蒸气无毒,且不易燃。 14、什么是生化工程的上游工程和下游工程?

在生物产品生产过程中一般将微生物发酵、酶反应过程或动植物细胞大量培养 称为“上游工程”,而与之相应的产物回收、粗分离、纯化及加工等后续过程就 称之为“下游工程”,或称之为生化分离和纯化过程。 15、生物产业废水处理中常用的膜分离技术有哪些?

在生物产业废水处理中常用的有扩散渗析、电渗析、反渗透、超滤等四种膜分离 技术。

16、透析膜一般为孔径5?10nm的亲水 膜,例如纤维素膜、聚丙烯腈膜和聚酰 胺膜等。

17、 板框压滤机工作周期?

板框压滤机是一种传统的过滤设备,其过滤推动力来自泵产生的液压或进料贮槽中的气压。它的一个工作周期包括装合、过滤、洗涤(吹干)、去饼、洗净等过程。 18、 常速离心机和超速离心机的区别?

常速离心机:相对离心力(RCF)在l×l04×g以下。主要用于细胞、细胞碎片和培养基残渣等固形物的分离,也用于酶的结晶等较大颗粒的分离。

超速离心机:相对离心力可以高达106×g。主要用于DNA、RNA、蛋白质等生物大分子以及细胞器、病毒等的分离纯化,样品纯度的检测,沉降系数和相对分。 19、薄层吸附色谱展开剂选择的原则是什么?

薄层吸附色谱展开剂选择的原则:对被分离组分应具有一定的解吸附能力,极性应比被分离物质的极性略小;展开剂应对被分离物质具有一定的溶解能力。

20、在高离子强度溶液中,温度升高,蛋白质的溶解度下降,在pH接近蛋白质等电点的溶液中蛋白质的溶解度最小。

21、细胞破碎方法可分为哪些类型?简述细胞破碎的意义。 酶学破碎法:外加酶制剂、自溶法。

机械破碎法:高速捣碎法、高速均浆法、高速磨珠法 物理破碎法:温差法、压差法、超声波

化学破碎法:有机溶剂法、表面活性剂(SDS 等)、金属螯合剂(Mg2+、Ca2+、EDTA)、化学变性剂。

破碎细胞,是为了方便提取其中的各种物质,分析细胞的结构,遗传物质的研究,对人类的发展具有重要的意义。

22、反渗透是渗透的一种反向迁移运动,它主要是在压力推动下,借助半透膜的截留作用,迫使溶液中的济剂与溶质分开。 24、生化分离方法选择的基本原则? 1)、尽可能简单、低耗、高效、快速。

2)、分离步骤尽可能少。 A)分离步骤越多,回收率越低; B)、分离步骤多,设备投入大,人员物资消耗大,生产周期长。

3)、避免相同原理的分离技术多次重复出现。比如,分子筛和超滤技术按分子量大小


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