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(2)①引物Ⅰ和引物Ⅱ局部发生碱基互补配对而失效 ②引物 Ⅰ′自身折叠后会出现局部碱基互补配对而失效
(3)DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸连续结合到双链DNA片段的引物链上
13．如图为细胞内DNA复制过程示意图，该过程在体外也可进行，以获得大量相同的DNA片段，该项技术被称为PCR技术，又称多聚酶链式反应，请分析回答：
(1)PCR过程与细胞内DNA复制相比，主要不同点是
________________________________________________________________________。 (2)PCR技术过程的三个步骤是：________、________、________。
(3)假设PCR过程中，只用一个DNA片段作为模板，30次循环后，理论上反应物中有________个这样的DNA片段。
(4)PCR技术能在几小时内将微量的DNA片段特异性地扩增上百万倍，从而解决了样品中DNA含量低，难以分离的难题，试举两例，说明
PCR
技术的应用：
________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
解析：(1)PCR过程与细胞内DNA复制相比，主要不同点是：PCR过程是高温变性解旋，不需要解旋酶。(2)PCR的每次循环可以分为变性、复性和延伸三个步骤。(3)由于一个DNA片段作为模板，一次循环能产生2个DNA片段，所以30次循环后，反应物中大约有2个这样的DNA片段。(4)PCR技术有广泛的应用，可以用于遗传疾病的诊断、刑侦破案、亲子鉴定等方面。
答案：(1)PCR过程是高温变性解旋，不需要解旋酶 (2)变性 复性 延伸 (3)2 (4)刑侦破案、亲子鉴定、疑难疾病的诊断、基因序列分析等
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