loading1.转座子
能在细菌基因组上从一个位点移至另一个位点的DNA序列。除携带与转位有关的基因外，还携带耐药性基因,抗金属基因、毒素基因及其他结构基因等。因此当Tn插入某一基因时，一方面可引起插入基因失活产生基因突变，另一方面可因带入耐药性基因而使细菌获得耐药性。 2.插入序列
是最小的转位因子，长度不超过2kb，不携带任何已知与插入功能无关的基因区域，往往是插入后与插入点附近的序列共同起作用，可能是原细胞正常代谢的调节开关之一。 3.质粒的不相容性.
两个复制和维持机制密切相关的质粒不能在一个宿主细胞中长期共存的现象。 4.鉴别培养基
利用各种细菌分解糖类和蛋白质的能力及其代谢产物的不同，在培养基中加入特定的底物，观察细菌在生长时分解底物的特征，鉴别不同细菌。 5.毒力岛
毒力岛最早是用来描述泌尿道致病性大肠杆菌的两个相对分子质量很大的、编码许多毒力相关基因的、不稳定的染色体DNA片段。它的基因产物许多是分泌性蛋白和细胞表面蛋白等一些毒力岛编码细菌的分泌系统、信息传导系统和调节 6.M细胞
M细胞存在于淋巴滤泡上皮之间，与肠上皮细胞紧密排列在一起，形成上皮屏障，并与其口袋中的各种淋巴细胞紧密接触，肠腔中的大部分病原体是由M细胞转运的，表明M细胞的主要功能是摄取并转运抗原(尤其是颗粒性抗原)至其下的免疫细胞系统。 7.细菌室必须符合的条件
1. 安装严密的门窗，以防止外部污浊的空气和昆虫进入室内污染环境, 或微生物逸出。室内禁用电扇（根据需要可安装空调）。
2. 必须安装供空气消毒的紫外线灯，置于离工作台面1米的高度，开始工作前照射20分钟。
3. 备有洗手和标本处理水源及消毒剂水盆。
4. 常备消毒剂，对菌液污染的台面和地面进行消毒处理。 5. 室内台面用后要用消毒剂进行消毒，地面每周至少消毒1次。
6. 接收样本的器具和已消毒器具要分别放置于指定地点，特别是无菌和有菌器具要分开管理。用过的试管、平皿必须及时高压灭菌处理。 7. 不能或不便高压灭菌的样本和废弃物品必须焚化处理 8. 配备必要的消防设备
8. 为建立正确快速的分离和鉴定细菌的方法，临床细菌室的要求。 1. 选择国际公认的分离及鉴定参考方法和试剂作为实验室的常规试验 2. 在分离和鉴定的各步骤设立完整的室内质量监控体系 3．建立临床菌库
9. 微生物基因组序列测定的意义？
1、研究病原微生物的致病机制及其与宿主的相互关系 2、建立更灵敏特异的分子诊断技术 3、开发抗微生物新药和新疫苗 4、为遗传疾病机制提供参考
5、为开发和利用微生物资源提供更为有效的手段 10.如何正确采集和处理标本 （一）注意事项
⒈ 采取血液、脑脊髓液或穿刺液时应严格无菌操作，避免杂菌污染。 粪便、肛拭子、鼻咽拭子应放置与灭菌容器内尽可能避免标本外细菌混入。
⒉ 应在使用抗菌素前采集标本。
⒊ 盛标本的容器不得用消毒剂或酸碱类消毒处理。
⒋ 尽快送检，或根据分离病原的不同保存于适当的温度条件下，如冷冻等。 （二）采集、包装和送检过程中要注意安全 （三）选择适宜的培养基是分离出病原菌的重要环节 11.脉冲场凝胶电泳原理?
1.分子量超过40kb的现状双链DNA，在恒场强水平琼脂糖凝胶中以相同的速率迁移而难以分离。即，大于40kb的DNA的迁移率几乎与分子大小无关。 2.DNA分子在交替变换方向的电场中作出反应所需的时间取决于其分子量大
小。较小的分子重新定向较快，故在凝胶中移动也较快，不同大小的分子因而被分离。
12.细菌染色体基因的排列特征
1.部分基因在染色体上单独存在, 转录成一个mRAN, 翻译成一个蛋白. 2.多数情况下, 编码相关功能蛋白的一小串基因位于一个操纵子之后, 从一个启动子开始, 转录成多基因的mRNA, 再翻译成蛋白多聚体.
3.启动子的方向决定转录正链或负链. 在细菌染色体中，两条单链作为有意义链的概率相等.
4.亲缘关系相近的细菌, 其基因在染色体上的排列顺序非常相似. 13.慎重使用抗菌药应注意那几点？
1.尽可能少用抗菌剤, 重在改进饲养管理方式 2.兽医师亲自诊断后再开处方 3.正确诊断, 非用不可,酌量使用
4.根据抗菌活性、投与途径、组织分布等选择最佳药物 5.医疗上重要的抗菌剤, 无其他治疗办法的情况下使用
6.因多种抗菌药并用疗法会增加耐性菌产生的机会应注意防止残留 7.遵守兽医师职业道德 14. 临床微生物室的任务和职责 一、建立正确、快速的检验方法 ㈠建立正确快速的分离和鉴定方法
为达到这一目的，临床细菌室应作到以下几点：
1.选择国际公认的分离及鉴定参考方法和试剂作为实验室的常规试验 2. 在分离和鉴定的各步骤设立完整的室内质量监控体系 3 建立临床菌库
㈡ 建立正确的药敏试验方法
选择正确的方法 药敏结果的审核和药敏规则的标准化 二、与临床建立密切联系
建立带有评论和注释的细菌学报告 制定标本采集指南和规则 参与治疗方案的制定
获取临床资料
注意与临床人员沟通, 尤其是推广新试验、新技术时 三、 不断提高细菌学基础理论水平 15.毒力岛研究方法及其意义 研究方法:
有毒株与无毒株之间的消减杂交 基因图谱多态性分析 直接测序分析, 岛探针技术 菌内表达技术, 荧光标记表达技术 意义:
标明菌的进化
有助于进一步了解病原菌的致病机理 预测可能出现的新病原菌 16正常菌群的生理意义 1.生物拮抗 2.营养作用 3.免疫作用
4.排毒，抗肿瘤和抗衰老作用 17.对付耐药菌有哪些方法？ 1.恢复微生态环境 2.利用噬菌体 3.应用疫苗 4.应用抗生素 5.改造药物
18.什么是细菌内毒素？其基本特性是什么？
内毒素特指革兰氏阴性菌外膜中的脂多糖(LPS)成分，细菌在死亡后破裂或人工裂解后释放。革兰氏阳性菌细胞壁中的脂磷酸(LTA)具LPS活性，不致热。 特性：内毒素耐热：100℃，1h不破坏；不能被甲醛脱毒成类毒素；抗原性弱，抗体无中和内毒素作用。
19.如何认真区分污染菌 ⒈观察菌落是否在划线上 ⒉每次培养需要做无菌对照
⒊ 结合拟培养的细菌生长特点去对照判断（菌落的形状、大小、色泽、边缘、透明度、湿润度、溶血现象等）
⒋注意观察培养时间，如布鲁氏菌、支原体、钩体、结核分枝杆菌的生长缓慢。 ⒌涂片染色检查，观察是否与目的菌一样。 20.细菌耐药机理 1．细菌酶使药物失活
（1）β-内酰胺酶降解（PC耐性:β-Lactamase，分A，B，C，D四类） A. G-菌水解酶 TEM-1 B. 金属结合酶 锌-巯基
C. E.coli.绿脓杆菌β-内酰胺酶 D. 苯唑西林水解酶
（2）氨基甙类钝化酶：乙酰转移酶；核苷酸转移酶；磷酸转移酶 （3）氯霉素胞内乙酰转移酶对药物修饰(CP耐性:乙酰化) （4）红霉素酯化酶
（5）溶血性链球菌，E.coli的灭活酶 (灭活大环酯类，林可霉素和链阳性菌素) 2.降低細胞膜对药物的通透性
（1）孔蛋白减少（β-Lactam类耐性）沙门氏菌多重耐药 （2）孔蛋白变异（IPM耐性）
3．药物作用靶位的构造改变或产生新靶位 （1）PBP构造改变（β-Lactam类耐性） （2）DNA旋转酶结构改变（氟喹诺酮类耐性） （3）核糖体RNA结构改变（大环内酯耐性） 4．药物主动排出泵 （TC耐性、氟喹诺酮类耐性） 5. 增加药物的拮抗物的产量