loading调节荧光计的狭缝宽度来消除
为消除拉曼光的影响可选择适当的溶剂和选用合适的激发光波长
2．何谓荧光效率？具有哪些分子结构的物质有较高的荧光效率？
荧光效率又称荧光量子效率，是物质发射荧光的量子数和所吸收的激发光量子数的比值称，用Ψf表示。
以下分子结构的物质有较高的荧光效率： (1)长共轭结构：如含有芳香环或杂环的物质。
(2)分子的刚性和共平面性：分子的刚性和共平面性越大，荧光效率就越大，并且荧光波长产生长移。
(3)取代基：能增加分子的π电子共轭程度的取代基，常使荧光效率提高，荧光长移，如-NH2、-OH、-OCH3、-CN等。
3．哪些因素会影响荧光波长和强度？ (1)温度：物质的荧光随温度降低而增强。
(2)溶剂：一般情况下，荧光波长随着溶剂极性的增大而长移，荧光强度也有增强。溶剂如能与溶质分子形成稳定氢键，荧光强度减弱。
(3)pH：荧光物质本身是弱酸或弱碱时，溶液的pH对该荧光物质的荧光强度有较大影响。 (4)荧光熄灭剂：荧光熄灭是指荧光物质分子与溶剂分子或溶质分子的相互作用引起荧光强度降低或荧光强度与浓度不呈线性关系的现象。
(5)散射光的干扰：包括瑞利光和拉曼光对荧光测定有干扰。
4．请设计两种方法测定溶液Al3+的含量。（一种化学分析方法，一种仪器分析方法） 配位滴定：利用铝与EDTA的配位反应进行滴定分析，因铝与EDTA的反应速率比较缓慢，而且铝对指示剂有封蔽作用，因此铝的测定一般用EDTA作为标准溶液，返滴定法或置换滴定法测定。
仪器分析法：利作铝离子与有机试剂如桑色素组成能发荧光的配合物，通过检测配合物的荧光强度以来测定铝离子的含量。原子吸收分光光度法.
5．一个溶液的吸光度为0.035，试计算式（12?5）括号中第二项与第一项之比。
(?2.3ECl)2(?2.3?0.035)2?2.3ECl??(2.3?0.035)?0.0403 2!2
6．用荧光法测定复方炔诺酮片中炔雌醇的含量时，取供试品20片（每片含炔诺酮应为
0.540.66mg，含炔雌醇应为31.5~38.5?g），研细溶于无水乙醇中，稀释至250ml，滤过，取滤液5ml，稀释至10ml，在激发波长285nm和发射波长307nm处测定荧光强度。如炔雌醇对照品的乙醇溶液（1.4?g/ml）在同样测定条件下荧光强度为65，则合格片的荧光读数应在什
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么范围内？ （58.5~71.5）
测定液中炔雌醇的浓度范围在
31.5?g?205ml38.5?g?205ml?~?250ml10ml250ml10ml即:1.26~1.54?g/ml之间为合格1.4?g/ml的对照品溶液的荧光计计数为65由FxCx?,得合格片的荧光计计数应在58.5~71.5之间FsCs
7．1.00g谷物制品试样，用酸处理后分离出VB2及少量无关杂质，加入少量KMnO4，将VB2氧化，过量的KMnO4用H2O2除去。将此溶液移入50ml量瓶，稀释至刻度。吸取25ml放入样品池中以测定荧光强度（VB2中常含有发生荧光的杂质叫光化黄）。事先将荧光计用硫酸奎宁调至刻度100处。测得氧化液的读数为6.0。加入少量连二亚硫酸钠（Na2S2O4），使氧化态VB（重新转化为VB2，这时荧光计读数为55。在另一样品池中重新加入24ml2无荧光）
被氧化的VB2溶液，以及1ml VB2标准溶液（0.5?g/ml），这一溶液的读数为92，计算试样中VB2的含量。 （0.5698?g/g）
25ml氧化液的荧光计数为6.0，相当于空白背景；测定液的荧光计数为55，其中VB2的荧光为55-6.0=49
24ml氧化液+ 1ml VB2标准溶液的荧光读数为92，其中VB2标准溶液（0.5?g/ml）的荧光读数为92-6=86，
则25ml测定液中含VB2 0.5×49/86 = 0.2849 （?g） 故谷物中含VB2 0.2849×50/25 = 0.5698 （?g/g）
红外吸收光谱法 思考题和习题
1、红外光区是如何划分的?写出相应的能级跃迁类型. 区域名称 近红外区 泛频区 中红外区 波长(μm) 波数(cm-1) 0.75-2.5 13158-4000 能级跃迁类型 OH、NH、CH键的倍频吸收 基本振动2.5-25 4000-400 分子振动，伴随转动 区 分子转动远红外区 25-300 400-10 分子转动 区 2、红外吸收光谱法与紫外可见吸收光谱法有何不同？
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起源 适用 I R 分子振动、转动能级跃迁 所有红外吸收的化合物 UV 外层价电子能级及振动、转动能级跃迁 具n-π*、π-π*跃迁有机化合物 简单、特征性不强 特征性 特征性强 吸光度或透光率为纵坐标，波长为光谱描述 透光率为纵坐标，波数为横坐标 横坐标 用途 鉴定化合物类别、鉴定官能团、定量、推测有机物共轭骨架 推测结构 光 源 单色器 吸收池 检测器 I R Nernst灯和硅碳棒 Michelson干涉仪或光栅 盐窗做成的气体池或液体池 UV 紫外区使用氘灯，可见区使用钨灯 棱镜或光栅 紫外区须用石英比色皿 可见区用石英或玻璃比色皿 红外光谱仪与紫外－可见分光光度计在主要部件上的不同。 真空热电偶、热电型或光电导型光电倍增管 检测器
3.简述红外吸收光谱产生的条件。
（1）辐射应具有使物质产生振动跃迁所需的能量，即必须服从νL= △V·ν
（2）辐射与物质间有相互偶合作用，偶极矩必须发生变化，即振动过程△μ≠ 0；
4.何为红外非活性振动？
有对称结构分子中，有些振动过程中分子的偶极矩变化等于零，不显示红外吸收，称为红外非活性振动。
5、何为振动自由度？为何基本振动吸收峰数有时会少于振动自由度？
振动自由度是分子基本振动的数目，即分子的独立振动数。对于非直线型分子，分子基本振动数为3n-6。而对于直线型分子，分子基本振动数为3n-5。 振动吸收峰数有时会少于振动自由度其原因可能为：
分子对称，振动过程无偶极矩变化的红外非活性活性。 两个或多个振动的能量相同时，产生简并。 吸收强度很低时无法检测。
振动能对应的吸收波长不在中红外区。
6.基频峰的分布规律有哪些？
（1）折合质量越小，伸缩振动频率越高
（2）折合质量相同的基团，伸缩力常数越大，伸缩振动基频峰的频率越高。
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（3）同一基团，一般?> ? > ?
7、举例说明为何共轭效应的存在常使一些基团的振动频率降低。
共轭效应的存在，常使吸收峰向低频方向移动。由于羰基与苯环共轭，其?电子的离域增大，使羰基的双键性减弱，伸缩力常数减小，故羰基伸缩振动频率降低，其吸收峰向低波数方向移动。
以脂肪酮与芳香酮比较便可说明。
8.如何利用红外吸收光谱区别烷烃、烯烃及炔烃？
ass-1
,?烷烃主要特征峰为?C?H,?CH又低于CH3,?CH2，其中νC-H峰位一般接近3000cm33000cm-1。
烯烃主要特征峰为??C?H,?C?C,??C?H，其中ν=C-H峰位一般接近3000cm-1又高于3000cm-1。νC=C峰位约在1650 cm-1。??C?H是烯烃最具特征的峰，其位置约为1000-650 cm-1。
炔烃主要特征峰为??C?H,?C?C,??C?H，其中??C?H峰位在3333-3267cm-1。?C?C峰位在2260-2100cm-1，是炔烃的高度特征峰。
9.如何在谱图上区别异丙基及叔丁基？
当两个或三个甲基连接在同一个C上时，则吸收峰?分裂为双峰。如果是异丙基，双
sCH3峰分别位于1385 cm-1和1375 cm-1左右，其峰强基本相等。如果是叔丁基，双峰分别位于1365 cm-1和1395 cm-1左右，且1365 cm-1峰的强度约为1395 cm-1的两倍。 10.如何利用红外吸收光谱确定芳香烃类化合物？ 利用芳香烃类化合物的主要特征峰来确定：
芳氢伸缩振动（?=C-H），3100~3000cm-1 (通常有几个峰) 泛频峰2000~1667cm-1 苯环骨架振动（?c=c），1650-1430 cm-1，~1600cm-1及~1500cm-1 芳氢面内弯曲振动（β=C-H），1250~1000 cm-1 芳氢面外弯曲振动（? =C-H），910~665cm-1
11．简述傅立叶变换红外光谱仪的工作原理及傅立叶变换红外光谱法的主要特点。
傅里叶变换红外光谱仪是通过测量干涉图和对干涉图进行快速Fourier变换的方法得到红外光谱。它主要由光源、干涉仪、检测器、计算机和记录系统组成。同色散型红外光谱仪比较，在单色器和检测器部件上有很大的不同。由光源发射出红外光经准直系统变为一束平行光束后进人干涉仪系统，经干涉仪调制得到一束干涉光，干涉光通过样品后成为带有样品信息的干涉光到达检测器，检测器将干涉光讯号变为电讯号，但这种带有光谱信息的干涉信号难以进行光谱解析。将它通过模／数转换器(A/D)送入计算机，由计算机进行傅里叶变换的快速计算，将这一干涉信号所带有的光谱信息转换成以波数为横坐标的红外光谱图，然后再
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