稳定表达EGFRvIII的U87MG细胞株的建立与鉴定

稳定表达EGFRvIII的U87MG细胞株的建立与鉴定

陈明;孙红宇;文荣朝;余政梁;吴巧琪;夏许可;张兴梅;高天明

【期刊名称】《数理医药学杂志》 【年(卷),期】2010(023)005

【摘要】目的:构建稳定表达表皮生长因子受体III型突变体(EGFRvIII)的U87MG细胞株.方法:采用电转染方法将pcDNA4/TO-EGFRvIII质粒导入U87MG细胞,加入zeocin筛选,进一步将细胞有限稀释并克隆化培养以建立稳定的转染细胞株.应用RT-PCR、Western blot及细胞免疫荧光染色方法鉴定稳定表达EGFRvIII基因的细胞株.结果:经RT-PCR鉴定发现V6号和V24号单克隆细胞株EGFRvIII基因mRNA水平高表达,进一步Western blot及细胞免疫荧光染色方法鉴定发现V6号细胞株EGFRvIII蛋白水平高表达.结论:成功建立了稳定表达EGFRvIII的U87MG细胞株,为进一步的抗肿瘤治疗及其机制研究提供基础.

【总页数】3页(516-518)

【关键词】EGFRvIII;U87MG细胞;基因表达

【作者】陈明;孙红宇;文荣朝;余政梁;吴巧琪;夏许可;张兴梅;高天明

【作者单位】南方医科大学基础医学院神经生物学教研室,广州,510515;南方医科大学基础医学院生理学教研室;南方医科大学基础医学院神经生物学教研室,广州,510515;南方医科大学基础医学院神经生物学教研室,广州,510515;南方医科大学基础医学院神经生物学教研室,广州,510515;南方医科大学基础医学院神经生物学教研室,广州,510515;南方医科大学基础医学院神经生物学教研室,广州,510515;南方医科大学基础医学院神经生物学教研室,广州,510515